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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/13861
PURIFICATION AND CHARACTERIZATION OF BMOOAI: A NEW TOXIN FROM BOTHROPS MOOJENI SNAKE VENOM THAT INHIBITS PLATELET AGGREGATION
Author
Affilliation
Universidade Federal de Uberlândia. Instituto de Genética e Bioquímica. Uberlândia, MG, Brazil / Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia em Nano-Biofarmacêutica. Belo Horizonte, MG, Brazil.
Universidade Federal de Uberlândia. Instituto de Genética e Bioquímica. Uberlândia, MG, Brazil / Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia em Nano-Biofarmacêutica. Belo Horizonte, MG, Brazil.
Universidade Federal de Uberlândia. Instituto de Genética e Bioquímica. Uberlândia, MG, Brazil / Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia em Nano-Biofarmacêutica. Belo Horizonte, MG, Brazil.
Universidade Federal de Uberlândia. Instituto de Genética e Bioquímica. Uberlândia, MG, Brazil / Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia em Nano-Biofarmacêutica. Belo Horizonte, MG, Brazil.
Universidade Federal de Uberlândia. Instituto de Genética e Bioquímica. Uberlândia, MG, Brazil./ Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia em Nano-Biofarmacêutica. Belo Horizonte, MG, Brazil.
Universidade Federal de Uberlândia. Instituto de Ciências Biomédicas. Uberlândia, MG, Brazil.
Universidade Federal de Uberlândia. Instituto de Genética e Bioquímica. Uberlândia, MG, Brazil.
Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia em Nano-Biofarmacêutica. Belo Horizonte, MG, Brazil / Universidade Federal de Uberlândia. Instituto de Ciências Biomédicas. Uberlândia, MG, Brazil.
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Estudos de Biomoléculas Aplicadas à Saúde e Núcleo de Saúde. Porto Velho, RO, Brazil / Universidade Federal de Rondônia. Porto Velho, RO, Brazil.
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Estudos de Biomoléculas Aplicadas à Saúde e Núcleo de Saúde. Porto Velho, RO, Brazil / Universidade Federal de Rondônia. Porto Velho, RO, Brazil.
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Estudos de Biomoléculas Aplicadas à Saúde e Núcleo de Saúde. Porto Velho, RO, Brazil / Universidade Federal de Rondônia. Porto Velho, RO, Brazil.
Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia em Nano-Biofarmacêutica. Belo Horizonte, MG, Brazil / Universidade Federal de Uberlândia. Instituto de Ciências Biomédicas. Uberlândia, MG, Brazil.
Universidade Federal de Uberlândia. Instituto de Genética e Bioquímica. Uberlândia, MG, Brazil / Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia em Nano-Biofarmacêutica. Belo Horizonte, MG, Brazil.
Universidade Federal de Uberlândia. Instituto de Genética e Bioquímica. Uberlândia, MG, Brazil / Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia em Nano-Biofarmacêutica. Belo Horizonte, MG, Brazil.
Universidade Federal de Uberlândia. Instituto de Genética e Bioquímica. Uberlândia, MG, Brazil / Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia em Nano-Biofarmacêutica. Belo Horizonte, MG, Brazil.
Universidade Federal de Uberlândia. Instituto de Genética e Bioquímica. Uberlândia, MG, Brazil./ Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia em Nano-Biofarmacêutica. Belo Horizonte, MG, Brazil.
Universidade Federal de Uberlândia. Instituto de Ciências Biomédicas. Uberlândia, MG, Brazil.
Universidade Federal de Uberlândia. Instituto de Genética e Bioquímica. Uberlândia, MG, Brazil.
Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia em Nano-Biofarmacêutica. Belo Horizonte, MG, Brazil / Universidade Federal de Uberlândia. Instituto de Ciências Biomédicas. Uberlândia, MG, Brazil.
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Estudos de Biomoléculas Aplicadas à Saúde e Núcleo de Saúde. Porto Velho, RO, Brazil / Universidade Federal de Rondônia. Porto Velho, RO, Brazil.
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Estudos de Biomoléculas Aplicadas à Saúde e Núcleo de Saúde. Porto Velho, RO, Brazil / Universidade Federal de Rondônia. Porto Velho, RO, Brazil.
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Estudos de Biomoléculas Aplicadas à Saúde e Núcleo de Saúde. Porto Velho, RO, Brazil / Universidade Federal de Rondônia. Porto Velho, RO, Brazil.
Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia em Nano-Biofarmacêutica. Belo Horizonte, MG, Brazil / Universidade Federal de Uberlândia. Instituto de Ciências Biomédicas. Uberlândia, MG, Brazil.
Abstract
In this paper, we describe the purification/characterization of BmooAi, a new toxin from Bothrops moojeni that inhibits platelet aggregation. The purification of BmooAi was carried out through three chromatographic steps (ion-exchange on a DEAE-Sephacel column, molecular exclusion on a Sephadex G-75 column, and reverse-phase HPLC chromatography on a C2/C18 column).
BmooAi was homogeneous by SDS-PAGE and shown to be a single-chain protein of 15,000 Da. BmooAi was analysed by
MALDI-TOF Spectrometry and revealed two major components with molecular masses 7824.4 and 7409.2 as well as a trace of
protein with a molecular mass of 15,237.4 Da. Sequencing of BmooAi by Edman degradation showed two amino acid sequences: IRDFDPLTNAPENTA and ETEEGAEEGTQ, which revealed no homology to any known toxin from snake venom. BmooAi
showed a rather specific inhibitory effect on platelet aggregation induced by collagen, adenosine diphosphate, or epinephrine in human platelet-rich plasma in a dose-dependent manner, whereas it had little or no effect on platelet aggregation induced by ristocetin. The effect on platelet aggregation induced by BmooAi remained active even when heated to 100∘C. BmooAi could be of medical interest as a new tool for the development of novel therapeutic agents for the prevention and treatment of thrombotic disorders.
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