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EXPRESSION AND PURIFICATION OF THE RECOMBINANT CONBR (CANAVALIA BRASILIENSIS LECTIN) PRODUCED IN ESCHERICHIA COLI CELLS
Nogueira, Nadia A. P. et al. | Date Issued: 2002
Author
Nogueira, Nadia A. P.
Grangeiro, Moema B.
Cunha, Rodrigo M. S. da
Ramos, Márcio Viana
Alves, Maria A. O.
Teixeira, Edson Holanda
Barral Netto, Manoel
Calvete, Juan J
Cavada, Benildo Sousa
Grangeiro, Thalles Barbosa
Affilliation
Universidade Federal do Ceará. Departamento de Analises Clínicas e Toxicológicas. Fortaleza, CE, Brasil
Universidade Federal do Ceará. Laboratório de Citogenética e Genética Molecular. Departamento de Biologia. Centro de Ciências. Fortaleza, CE, Brasil
Universidade Federal do Ceará. Laboratório de Citogenética e Genética Molecular. Departamento de Biologia. Centro de Ciências. Fortaleza, CE, Brasil
Universidade Federal do Ceará. Departamento de Biologia. Fortaleza, CE, Brasil
Universidade Federal do Ceará. Laboratório de Citogenética e Genética Molecular. Departamento de Biologia. Centro de Ciências. Fortaleza, CE, Brasil
Universidade Federal do Ceará. BioMol-Laboratório. Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular. Fortaleza, CE, Brasil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil
CIB, CSIC, Madrid, Spain
Universidade Federal do Ceará. BioMol-Laboratório. Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular. Fortaleza, CE, Brasil
Universidade Federal do Ceará. Laboratório de Citogenética e Genética Molecular. Departamento de Biologia. Centro de Ciências. Fortaleza, CE, Brasil
Abstract
ConBr, a D-glucose/D-mannose-specific lectin from Canavalia brasiliensis seeds, was produced in Escherichia coli from a cDNA clone subcloned to pET15b expression vector. The recombinant lectin (rConBr) was purified by onestep immobilized metal-affinity chromatography using an amino-terminal hexahistidine tag. By SDS-PAGE and Western blot, rConBr was highly pure with an apparent molecular mass of 37 kDa. N-terminal sequence analysis revealed a single sequence, confirming the identity of the expressed protein as the pre-pro-ConBr.
DeCS
Fabaceae/genética
Lectinas/genética
Lectinas/metabolismo
Western Blotting
Clonagem Molecular/métodos
Escherichia coli/genética
Escherichia coli/metabolismo
Fabaceae/metabolismo
Expressão Gênica
Histidina/química
Histidina/metabolismo
Humanos
Lectinas/química
Níquel/química
Níquel/metabolismo
Lectinas de Plantas
Plasmídeos
Proteínas Recombinantes
 
Publisher
Bentham Science Publishers Ltd.
Citation
NOGUEIRA, N. A. P. et al. Expression and purification of the recombinant ConBr (Canavalia brasiliensis lectin) produced in Escherichia coli cells. Protein and Peptide Letters, v. 9, n. 1, p. 59-66, 2002.
ISSN
0929-8665