Trypanosoma cruzi e o sistema complemento : ativação da via das lectinas e papel da microvesículas derivadas das células do hospedeiro na resistência à lise

Abstract

Trypanosoma cruzi, o agente etiológico da doença de Chagas, precisa evadir o sistema imune inato do hospedeiro vertebrado durante a infecção. O sistema complemento é o principal mecanismo de defesa do sistema imune inato. Ele é composto de várias proteínas, ativadas em cascata, que culmina com a formação do complexo de ataque a membrana e lise do patógeno. O sistema complemento pode ser ativado através da via clássica, das lectinas e alternativa. T. cruzi tripomastigota metacíclicos, o estágio infectivo liberado durante a picada do inseto vetor, precisa sobreviver ao ataque do sistema complemento e infectar as células hospedeiras para continuar o seu ciclo de vida e provocar a doença. O principal objetivo dessa tese foi investigar como os tripomastigotas metacíclicos de T. cruzi evadem o sistema complemento durante a infecção. Inicialmente, nós identificamos pela primeira vez que T. cruzi ativa a via das lectinas. As proteínas do soro MBL (Mannan binding lectin), L-ficolina e H-ficolina ligam a carboidratos na superfície dos tripomastigotas metacíclicos. Essas moléculas se associam a MASP2 (MBL-associated serine protease 2), que cliva os componentes C2 e C4 para formar a C3 convertase (C4b2a) e ativar a cascata do complemento. Nós também detectamos que várias cepas de T. cruzi no estágio tripomastigota metacíclico são sensíveis à lise mediada pelo complemento com soro humano não imune, enquanto outras cepas são resistentes. O sistema complemento foi capaz de limitar a invasão celular das cepas sensíveis, indicando que o complemento atua como uma barreira fisiológica durante a infecção por T. cruzi. Por outro lado, nós propomos dois novos mecanismos de evasão da lise mediada pelo complemento por T. cruzi tripomastigotas metacíclicos. Identificamos e caracterizamos um receptor de C2 do complemento expresso no estágio tripomastigota metacíclico : CRIT (Complement C2 receptor inhibitor trispanning) liga ao C2 e inibe a sua clivagem pela enzima MASP2, e consequentemente, inibe a formação da C3 convertase e a lise do parasita. Por outro lado, identificamos que tripomastigotas metacíclicos induzem monócitos e linfócitos a liberarem PMVs (Plasma membrane-derived vesicles). As PMVs estabilizam a C3 convertase (evitando a sua dissociação da superfície de T. cruzi) e inibem a sua atividade catalítica, portanto, elas contribuem para a inibição da lise pelo complemento. As PMVs também carream TGF-_ da célula de origem. As PMVs contendo TGF-_ ligam ao T. cruzi e induzem um aumento da invasão celular. T. cruzi também induz um aumento da liberação de PMVs em camundongo, assim como a parasitemia de T. cruzi em camundongos aumenta na presença das PMVs, indicando que as PMVs é um fator do hospedeiro induzido por T. cruzi que contribui para a evasão imune. Nós concluimos que a evasão do sistem complemento por T. cruzi é um mecanismo multifatorial que depende tanto de receptores da superfície do parasita quanto de fatores do hospedeiro modulados durante a infecção.