Perfil de expressão dos miRNAs membros do cluster C19MC em amostras de soro/plasma de gestantes com complicações obstétricas atribuídas às infecções pelos vírus Zika e Chikungunya

Abstract

Os microRNAs (miRNAs) são pequenos RNAs não codificantes que desempenham papéis cruciais na regulação da expressão gênica. A função antiviral associada a essas moléculas, especialmente a membros do cluster de miRNAs do cromossomo 19 (C19MC), tem sido objeto de estudo em gestantes, uma vez que são expressos majoritariamente na placenta. Durante a gravidez, as infecções por Zika (ZIKV) e Chikungunya (CHIKV) estão relacionadas a diversas complicações obstétricas (CO) como síndromes hipertensivas, síndrome HELLP, por exemplo. Nesse contexto, este estudo examinou a expressão dos miRNAs hsa-miR-512-3p, hsa-miR-516b-5p, hsamiR-517-5p e hsa-miR-525-5p circulantes, membros do C19MC, em gestantes com CO atribuídas às infecções por ZIKV ou CHIKV. Amostras de soro/plasma de gestantes com CO infectadas (n= 122) ou não infectadas (n= 39) e gestantes sem CO infectadas (n= 76) foram analisas quanto ao nível de expressão dos miRNAs por qPCR e a expressão relativa foi calculada usando o ACTB como gene endógeno. Para os miRNAs detectados, a correlação entre seus níveis de expressão e dados clínicolaboratoriais foi avaliada e as vias biológicas reguladas por seus genes alvos foi verificada in sílico por meio do miRTarBase e Enrichr. Diferenças foram consideradas significativas para valor de p<0,05. O protocolo de pesquisa foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa do Instituto Aggeu Magalhães (CAAE: 9404519.3.0000.5190). Apenas o hsa-miR-516b-5p foi detectado nas amostras analisadas, por isso, as análises foram feitas apenas para ele. Para fins de análise, o perfil de expressão foi avaliado considerando a infecção sem distinção do tipo de vírus e, posteriormente, estratificado por vírus. Na análise conjunta, o hsa-miR-516b-5p revelou-se mais expresso em gestantes com CO infectadas (p = 0,0012) em relação às não infectadas. Mulheres infectadas sem CO apresentaram níveis de expressão ainda maiores em comparação às mulheres com CO (p = 0,0142). Na análise estratificada, esse padrão de expressão foi mantido para ZIKV, com níveis maiores entre infectadas com CO (p= 0,0330) e ainda maiores na ausência de CO (p = 0,0037). Para CHIKV, a diferença foi observada apenas entre mulheres infectadas com CO (p = 0,0083). Correlações negativas foram observadas entre a expressão do hsa-516b-5p e a concentração de linfócitos (U/L) em gestantes com CO infectadas (r= - 0,2016, p= 0,0477). Foram identificadas 8 vias moleculares significativamente enriquecidas e as funções moleculares identificadas estão, na maioria, relacionadas a processos de regulação do ciclo de vida viral e modificações dos mRNA alvos. Concluímos que níveis elevados do hsa-miR-516b-5p na circulação de gestantes com complicações obstétricas ou não se associam com a exposição materna os vírus Zika e Chikungunya.