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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/6630
PADRONIZAÇÃO DE CONDIÇÕES PARA DETECÇÃO DE DNA DE LEISHMANIA SPP. EM FLEBOTOMÍNEOS (DIPTERA, PSYCHODIDAE) PELA REAÇÃO EM CADEIA DA POLIMERASE.
Título alternativo
Standardization of conditions for PCR detection of Leishmaniaspp. DNA in sand flies (Diptera, Psychodidae)Autor(es)
Afiliação
Universidade de São Paulo. Instituto de Medicina Tropical de São Paulo. São Paulo, SP, Brasil/ Universidade de São Paulo. Instituto de Ciências Biomédicas. São Paulo, SP, Brasil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil
Universidade de São Paulo. Faculdade de Saúde Pública. São Paulo, SP, Brasil.
Universidade de São Paulo. Instituto de Medicina Tropical de São Paulo. São Paulo, SP, Brasil/ Universidade de São Paulo. Instituto de Ciências Biomédicas. São Paulo, SP, Brasil
Universidade de São Paulo. Instituto de Medicina Tropical de São Paulo. São Paulo, SP, Brasil/ Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina. São Paulo, SP, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil
Universidade de São Paulo. Faculdade de Saúde Pública. São Paulo, SP, Brasil.
Universidade de São Paulo. Instituto de Medicina Tropical de São Paulo. São Paulo, SP, Brasil/ Universidade de São Paulo. Instituto de Ciências Biomédicas. São Paulo, SP, Brasil
Universidade de São Paulo. Instituto de Medicina Tropical de São Paulo. São Paulo, SP, Brasil/ Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina. São Paulo, SP, Brasil.
Resumo
A correta identificação dos agentes etiológicos em insetos vetores é de crucial importância aos estudos epidemiológicos. A pesquisa de flagelado nesses vetores, pela dissecção de seu trato digestivo, observação microscópica do seu conteúdo ou por isolamento dos parasitas provenientes de insetos em meios de cultura, tem-se mostrado operacionalmente inadequada e com baixa especificidade do diagnóstico, pois fêmeas de flebotomíneos também podem albergar outros flagelados como Trypanosoma e Endotrypanum. Acreditamos que por sua eficiência e especificidade, a amplificação de seqüências-alvo do DNA da Leishmania, por meio da reação em cadeia de polimerase, pode ser aplicada na investigação de sua presença em flebotomíneos, desde que estes estejam devidamente acondicionados e o DNA do parasita extraído a partir de metodologia adequada. Este trabalho descreve metodologias utilizadas na padronização da conservação dos espécimes de flebotomíneos e extração do DNA da Leishmania como uma alternativa mais prática que os métodos tradicionais.
Resumo em Inglês
The correct identification of etiological agents in vector insects is crucial for epidemiological studies. Identification of flagellates in such vec-tors, usually by dissection of the digestive tract and microscopic observation of the contents as well as attempts at parasite isolation from in-sects in culture media, have proven operation-ally inadequate and with poor diagnostic speci-ficity, since female sand flies are also hosts for other flagellates like Trypanosomaand Endo-trypanum. Due to the efficiency and specificity of DNA target sequence amplification by poly-merase chain reaction (PCR), the latter could be used to investigate the presence of Leishmaniain sand flies, although the insects need to be prop-erly stored and the Leishmania DNA extracted using appropriate methodology. This paper de-scribes methodologies to standardize sand fly storage and Leishmania DNA extraction in such specimens as a more practical method in field studies.
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