Interação tripartida: Leishmania, microbiota e Lutzomyia longipalpis

Abstract

As leishmanioses são um grupo de doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania, que são transmitidas pela picada de flebotomíneos. No Novo Mundo, Lutzomyia longipalpis é um importante vetor da Leishmania infantum, o agente etiológico da leishmaniose visceral no Brasil. A microbiota nativa dos flebotomíneos tem ganhado relevância e sua composição muda de acordo com os distintos estágios de desenvolvimento, sendo fortemente influenciado pelo local onde vivem, pelas fontes alimentares e condições fisiológicas. A diversidade da microbiota e as interações hospedeiro-microbiota-patógeno em relação às espécies de flebotomíneos do Novo Mundo ainda precisam ser amplamente estudadas. Os flebotomíneos adultos foram coletados na Gruta da Lapinha/MG através de armadilhas luminosas do tipo CDC e identificados morfologicamente. A microbiota do intestino médio foi isolada usando uma técnica dependente de cultura e sequenciamento do gene 16s rRNA. O sequenciamento revelou 13 gêneros bacterianos distintos em Lu. longipalpis sob diversas condições fisiológicas e estágios de desenvolvimento (Bacillus, Enterococcus, Erwinia, Enterobacter, Escherichia, Klebsiella, Lysinibacillus, Pseudocitrobacter, Providencia, Pseudomonas, Serratia, Staphylococcus e Solibacillus). Os efeitos in vitro e in vivo de cada uma das 13 bactérias nativas da Lu. longipalpis foram analisados por cocultivo com promastigotas de Leishmania infantum chagasi, Leishmania major, Leishmania amazonensis e Leishmania braziliensis. Após 24 h de cocultivo, uma redução do crescimento é observada em todas as espécies de parasitas. Quando os parasitas foram co-cultivados com Lysinibacillus, todos os parasitas de L. i. chagasi e L. amazonensis morreram em 24 horas. Na coinfecção in vivo de L.i. chagasi, L. major e L. amazonensis com os gêneros Lysinibacillus, Pseudocitrobacter e Serratia foi possível observar uma diferença significativa entre os grupos coinfetados com os gêneros bacterianos e o grupo controle. Mesmo quando os insetos já apresentavam uma infecção inicialmente estabelecida com L. i. chagasi, os gêneros bacterianos Lysinibacillus e Serratia ainda foram capazes de competir com os parasitos, causando uma queda na taxa de infecção no vetor. Esses achados sugerem que as bactérias simbiontes (Lysinibacillus, Serratia e Pseudocitrobacter) são candidatos potenciais para o controle paratransgênico ou biológico. Mais estudos são necessários para identificar a natureza das moléculas efetoras envolvidas na redução da competência do vetor para Leishmania.