Caracterização química da miconia albicans (sw.) triana e atividade inibitória in vitro de seus extratos sobre o vírus chikungunya

Abstract

A febre Chikungunya é uma arbovirose transmitida pelo vírus chikungunya, com sintomas de dores intensas nas articulações e dores de cabeça. Sem terapias antivirais, a população tem usado a espécie Miconia albicans (MA, “canela-de-velho”) como tratamento. O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antiviral dos extratos de folhas e de galhos dessa espécie, em EtOH 70%, ou EtOH 95% alcalinizado com hidróxido de sódio. O clean-up dos extratos foi realizado por partição em MeOH-água/hexano e também com amberlite XAD-4, cuja otimização foi monitorada por CCD e CLAE-DAD para a presença de polifenóis. A limpeza em resina e condições analíticas (CCD e HPLC) foram aplicadas a nove amostras comerciais de MA. Os teores de polifenóis totais (TP) e flavonóides totais (TF) foram determinados por Folin-Ciocaulteu e análise colorimétrica na presença de AlCl3, respectivamente. Na espécie coletada foram analisados qualitativamente os ácidos triterpênicos por CG-EM após trimetilsililação dos extratos alcalinos. O extrato da folha (2,8-7,1% de rendimento) continha principalmente flavonóides, incluindo rutina, quercitrina e isoquercitrina, conforme indicado por HPLC-DAD e injeções de compostos padrão. A quantificação por HPLC-DAD com curvas de calibração independentes resultou em 0,55 mg/g, 1,59 mg/g e 1,13 mg/g de extrato para os três flavonoides glicosilados, respectivamente. Os galhos apresentaram apenas baixa concentração de isoquercitrina (0,08 mg/g). O teor de PT nas folhas resultaram entre 50-200 mg querc-equiv/g extrato, em metanol, e 100-400 mg querc-equiv/g amostra, em metanol/água 1:1. FT resultou entre 8-25 mg querc-equiv/g de extrato. CCD revelou que os ácidos ursólico (AU), oleanólico (AO) e betulínico (AB) concentraram seletivamente no extrato alcalinizado de MA. A atividade antiviral foi avaliada para os extratos brutos de folhas e galhos, o extrato de folhas após limpeza em XAD-4 (EFX), e o extrato alcalinizado das folhas (EFOH). Os experimentos foram realizados em doses tolerantes para células Vero (viabilidade acima de 80%), todas abaixo de 50 μg/ml. O extrato EFOH, avaliado via marcação de antígenos do Chikungunya por citometria de fluxo, foi efetivo em reduzir em 50% a infecção viral.