Leveduras de interesse da Saúde Pública da coleção CFAM ILMD/ Fiocruz Amazônia: sensibilidade a anidulafungina, resistência a fagocitose e formação de biofilme.

Abstract

Fungos na cavidade oral estão geralmente presentes no ser humano na forma comensal, mas podem vir a estabelecer uma infecção. Sabe-se que não depende somente das condições de saúde do paciente, mas que as leveduras participam ativamente desse processo através de mecanismos que são chamados de fatores de virulência. Neste estudo leveduras pertencentes a Coleção CFAM ILMD/Fiocruz Amazônia provenientes da cavidade oral, foram caracterizadas quanto à formação de biofilme, a susceptibilidade à anidulafungina e resistência à fagocitose. Para a avaliação do biofilme, células foram inoculadas (1 alçada de 10uL) em um tubo Falcon contendo 10mL de caldo Sabouraud com glicose a 8% e incubados a 35°C durante 24h. As suspensões foram vertidas, lavadas e coradas com solução a 1% de safranina e então examinados e classificados como negativo (N), positivo forte (PFo), positivo moderado (PM) e positivo fraco (Pfr). Para o teste de susceptibilidade à anidulafungina, foi utilizado Etest seguindo as recomendações do fabricante. Foram testadas 37 leveduras sendo 15 C. glabrata, 7 C. parapsilosis, 4 C. tropicalis, 3 C. albicans e 1 C metapsilosis; além de 3 Kodamaea ohmeri, 2 Meyerozyma guilliermondii, 1 Meyerozyma caribbica e 1 Saccharomyces cerevisiae. Para o teste de resistência à fagocitose foram utilizadas células THP-1 ativadas (macrófagos) e as 10 cepas que mais se destacaram na formação do biofilme e na falta de sensibilidade ao antifúngico. Houve formação de biofilme por todas as cepas, sendo a C. tropicalis (4/4) e K. ohmeri (3/3) as mais expressivas com todas suas cepas apresentando resultado PFo. A C. glabrata apresentou 6/15 PFo e C. parapsilosis apresentou 5/7 cepas PFo. A espécie M. guilliermondii apresentou 1/2 cepa PFo. A maioria das leveduras foram sensíveis ao antifúngico com MICs ≤ 2 µg/mL, com exceção de 3 cepas: 1 C. parapsilosis, 1 M. guilliermondii e 1 K. ohmeri. As cepas de K. ohmeri também apresentaram as menores médias de células fagocitadas e estatisticamente apresentaram uma resistência à fagocitose semelhante as cepas de espécies comumente envolvidas em fungemia. Apesar da anidulafungina ser um antifúngico de última geração os resultados mostraram cepas com falta de sensibilidade, dessa forma indicando que há a necessidade de avaliação dos antifúngicos para ter a melhor estratégia de tratamento. Portanto, as cepas estudadas são fungos oportunistas que apresentam características de virulência com potencial para a colonização de dispositivos invasivos e merecem atenção, especialmente as cepas de espécies de leveduras consideradas emergentes.