Análise de assinaturas de minicírculos do kDNA de Leishmania spp. presentes em amostras clínicas de pacientes com leishmaniose tegumentar americana de Pernambuco

Abstract

A Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) é uma doença que apresentacaracterísticas clínicas e epidemiológicas complexas, mediante a diversidade deespécies envolvidas na sua transmissão. Métodos de biologia molecular, baseadosem análise dos ácidos nucléicos, são aplicados na realização de estudos sobre avariabilidade genética dos parasitos, contudo a escolha do método e do marcador aser utilizado continua sendo um desafio. Os métodos convencionalmente utilizadospara estudos da variabilidade genética de Leishmania dependem do isolamentoprévio de parasitos em meios de cultura, o qual pode sofrer interferências de acordocom as condições de coleta e armazenamento do material biológico, além de serpassível de contaminações. Além disso, essas técnicas demandam o uso dereagentes e equipamentos adicionais que aumentam a complexidade e o custo doprocesso. Nesse contexto, a técnica molecular de LSSP-PCR (Low-StringencySingle Primer-Polimerase Chain Reaction) produz perfis genéticos que refletem asclasses de minicírculos predominantes, sendo utilizada em estudos que visamdiscriminar genótipos de espécies de Leishmania. Diante disso, o propósito doestudo foi a identificação de variantes genéticas de Leishmania presentes empacientes com diferentes manifestações clínicas da LTA. Foram incluídos no estudopacientes que apresentaram diagnósticos clínicos positivos para LTA. O diagnósticolaboratorial envolveu a abordagem molecular por meio da extração do DNA dasamostras de aspirado de lesão e sangue, seguidas da PCR convencional. 71pacientes foram analisados, havendo ocorrência de DNA do parasito em 18amostras de aspirado de lesão e nenhuma positividade através das amostras desangue. O resultado da LSSP-PCR gerou perfis de assinaturas de kDNA,mostrando, porém, que manifestações clínicas de LTA, descritas de uma maneiraabrangente, aparentemente não podem ser diferenciadas através de padrões deassinaturas de kDNA de Leishmania (Viannia) braziliensis.