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DESENVOLVIMENTO DE KIT DIAGNÓSTICO RÁPIDO PARA DETECÇÃO DE RESISTÊNCIA À METICILINA EM CEPAS DE ESTAFILOCOCOS
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Resumen en portugues
O surgimento de resistência a antimicrobianos em bactérias está se agravando ano
após ano, constituindo-se um problema de saúde pública em hospitais e centros de
tratamento ao redor do mundo. No Brasil, a resistência a meticilina em
Staphylococcus aureus(MRSA) chega a 29 % dos casos detectados anualmente.
Atualmente, a metodologia convencional para a identificação de MRSA pode levar
48 horas, portanto, este trabalho tem por objetivo o desenvolvimento de um teste
para diagnóstico rápido baseado na tecnologia de imunocromatografia de fluxo
lateral usando um anticorpo específico contra a proteína PBP2a, a qual confere
resistência ao Staphylococcus aureus, permitindo a identificação em minutos, a
partir de colônias isoladas. O anticorpo monoclonalanti-PBP2a foi purificado e
empregado em um processo de conjugação a microesferas de látex coloridas para a
implementação do teste rápido. Os resultados iniciais demonstraram a capacidade
do anticorpo de reconhecer a PBP2a em amostras de MRSA, porém foram
observados problemas de inespecificidade que deverão ser solucionados para dar
confiabilidade ao teste proposto.
Resumen en ingles
The emergence of antibiotic resistance in bacteria is getting worse year after year,
becoming a public health problem in hospitals and treatment centers around the
world. In Brazil, methicillin resistance in Staphylococcus aureus(MRSA) reaches
29% of cases detected annually. Currently, the conventional methodology for
identification of MRSA may take 48 hours of lengthyphenotypical tests, so this work
aims at developing a rapid diagnostic test based onthe lateral flow
immunochromatography protocol using a specific antibody against the protein
PBP2a, which confers the methicillin-resistance phenotype to Staphylococcus
aureus, allowing a prompt identification from isolated colonies. The monoclonal
antibody anti-PBP2a was purified and used in a process of conjugation to colored
latex microspheres for the implementation of the rapid test. Initial results
demonstrated the ability of the antibody to recognize the PBP2a in samples of
MRSA, but inespecificity issues will have to be solved to improve reliability of the test
proposed.
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