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2023-08-31
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ESTUDO DE PARÂMETROS FISIOLÓGICOS DE LUTZOMYIA LONGIPALPIS: AVALIAÇÃO DO EFEITO DE COMPOSTOS ANTI-LEISHMANIA E DETERMINAÇÃO DE IDADE
Ferreira, Tainá Neves | Fecha del documento:
2022
Autor
Director
Miembros de la junta
Afiliación
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Resumen en portugues
As leishmanioses são doenças causadas por parasitos do gênero Leishmania, que são transmitidos pela picada de flebotomíneos. Para controle da transmissão e redução do número de casos é necessário integrar diferentes estratégias, especialmente as que visam o controle vetorial. Os flebotomíneos adultos obtêm energia a partir de açúcares de origem vegetal, e dada a importância dessa dieta, essa característica vem sendo utilizada na elaboração de ferramentas de controle usando iscas açucaradas tóxicas atraentes, ATSB's. Os parasitos desenvolveram formas de superar barreiras e sobreviver dentro do intestino do vetor até seu completo desenvolvimento, mas em estudos recentes verificamos que compostos com efeito antiparasitário in vitro também são capazes de reduzir a carga parasitária e a prevalência de infecção. Assim, estudamos o efeito de compostos sintéticos com atividade anti-Leishmania em diferentes aspectos da fisiologia de L. longipalpis, adicionando-os à dieta açucarada e buscando os candidatos mais promissores para uso em controle de transmissão, afetando a infecção dentro do vetor. Nos testes de atração/repulsão, identificamos que apenas 2 compostos tiveram efeito, um atrativo (L4) e um repulsivo (P9). Em experimentos de ingestão de dieta açucarada contendo drogas, verificamos que L1, L3, L4, L7, P8 e P10 demonstraram um efeito inibidor de alimentação. Quanto à preferência entre as dietas, verificamos que flebotomíneos preferiram a dieta contendo os compostos L2, L7, P8, P9 e P10 em comparação à dieta controle. Nos ensaios de longevidade, L6 e P8 reduziram o tempo médio de vida (TMV) em machos e L2 e P8 fizeram o mesmo em fêmeas. Não foram observados efeitos inibitórios na alimentação sanguínea das fêmeas nem na produção de ovos. O composto L2 foi capaz de reduzir a quantidade de L. amazonensis no intestino de L. longipalpis no 3º dia após a infecção. O composto L2 parece ser o melhor candidato para o desenvolvimento de uma isca açucarada que minimize a transmissão, por reduzir o TMV de fêmeas e afetar o número de parasitos na infecção. Outro aspecto estudado, que influencia na medida de capacidade vetorial, foi a determinação de idade de flebotomíneos adultos. Através da espectroscopia no infravermelho próximo conseguimos estimar a proporção de flebotomíneos com idade ≤ ou ≥ 8 dias pós emergência, com precisão de 83 a 97%. E por análise de marcadores moleculares, identificamos que os genes LL005905 e LL001619 exibem padrão de expressão idade-dependente em L. longipalpis, sendo possível construir um modelo com tendência linear em função da menor expressão desses genes em insetos mais velhos. Essas técnicas se mostraram mais eficientes na previsão de idade em comparação às técnicas clássicas
Resumen en ingles
Leishmaniasis is a disease caused by parasites of the genus Leishmania, which are transmitted by the bite of sandflies. To control transmission and reduce the number of cases, it is necessary to integrate different strategies, especially those aimed at vector control. Adult sandflies obtain energy from sugars of plant origin, and given the importance of this diet, this characteristic has been used in the development of control tools using attractive toxic sugar baits, ATSB's. The parasites have developed ways to defend themselves and survive inside the vector's intestine until their complete development. In recent studies, we found that compounds with an in vitro antiparasitic effect are also able to reduce the number of parasites per insect and the percentage of infection. Thus, we studied the effect of synthetic compounds with anti-Leishmania activity on different aspects of L. longipalpis physiology, adding them to the sugary diet and looking for the most promising candidates for use in controlling transmission, affecting the infection within the vector. In the attraction/repulsion tests, we identified that only 2 compounds had an effect, one attractant (L4) and one repulsive (P9), when added to the sugar solution. In experiments of ingestion of sugary diets containing drugs, we found that L1, L3, L4, L7, P8 and P10 demonstrated a feeding inhibitory effect. In assays of preferences between diets, sandflies shown us a preference by diets that contained L2, L7, P8, P9, and P10 compared to the control diet. In longevity assays, L6 and P8 reduced the Mean Life Time (MLT) in males and L2 and P8 did the same in females. No inhibitory effects were observed on the blood feeding of the females or on the production of eggs. Compound L2 was able to reduce the amount of L. amazonensis in the intestine of L. longipalpis on the 3rd day post infection. L2 seems to be the best candidate for the development of a sugar bait that minimizes transmission, by reducing the MLT of females and affecting the number of parasites in the insect. Another aspect studied that influences the vector capacity was the determination of age of adult sandflies post-emergence. Using near-infrared spectroscopy, we estimated the proportion of sandflies aged ≤ or ≥ 8 days, with an accuracy of 83 to 97%. And by molecular analysis, we identified that the genes LL005905 and LL001619 exhibit an age-dependent pattern of expression in L. longipalpis, making it possible to build a model with linear trend as a function of the lower expression of these genes in older insects. These techniques proved to be more efficient in age prediction when compared to classical techniques
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