Avaliação da resposta de células T antígeno-específica na infecção pelo Plasmodium vivax

Abstract

A malária é uma doença potencialmente grave, transmitida por vetores Anopheles infectados com protozoários do gênero Plasmodium. No Brasil, cerca de 89,3% dos casos ocasionados pelo Plasmodium vivax. Embora a malária não induza uma proteção esterilizante de longo prazo, sabe-se que a resposta imune adaptativa humoral e celular são essenciais no controle do parasito. Entretanto, tem sido difícil mensurar a imunidade celular para P. vivax, principalmente devido à falta de antígenos adequados ou ao pequeno número de epítopos utilizados nos estudos. Por isso, com a finalidade de obtê-la de forma abrangente, o presente estudo visou construir uma biblioteca de 310 peptídeos de P. vivax (MPv310), envolvendo os antígenos com maior reconhecimento pelo sistema imune humano e, a partir dela, avaliar a resposta antígeno-específica de células T CD4+ e de suas subpopulações de memória (naive, CM, EM e efetora), baseada na produção de citocinas (IFN-, TNF e IL-17A) e expressão de marcadores de ativação (CD69 e CD154). Para isso, células mononucleares do sangue periférico (PBMC) de indivíduos infectados com o P. vivax, sintomáticos antes (SY-I) e após (SY-R) o tratamento, assintomáticos (ASY) e de indivíduos saudáveis (CTL) foram coletadas. Os linfócitos foram estimulados in vitro com MPv310 e analisados por citometria de fluxo. Os resultados demonstram que a biblioteca de peptídeos de P. vivax induziu aumento na frequência de células T CD4+ de memória produtoras de IFN-γ e TNF em ASY. Além disso, houve aumento da expressão simultânea de IFN-γ e TNF em células T CD4+ em SY-R e ASY e em células T CD4+ de memória em ASY. Com relação aos marcadores de ativação, observou-se que MPv310 induziu a expressão de CD69 em células T CD4+ em SY-R e ASY e em células T CD4+ de EM e efetoras em ASY. Por outro lado, houve aumento de células T CD4+ e suas subpopulações expressando CD154 em indivíduos sintomáticos. A frequência de células T CD4+CD69+CD154+ também foram mais altas em SY-I e SY-R. A caracterização fenotípica realizada neste estudo sugere que a biblioteca de peptídeos foi capaz de ativar células T em indivíduos sintomáticos e assintomáticos, evidenciando a presença de células T de memória específicas para os antígenos de P. vivax selecionados. Assim, a biblioteca de peptídeos utilizada nesse estudo agregou conhecimento sobre a resposta imune adaptativa de indivíduos naturalmente expostos ao P. vivax, apresentando diferentes formas clínicas da doença.