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EFEITO DO HOMOGENEIZADO DAS GLÂNDULAS SALIVARES DE MIGONEMYIA MIGONEI NA INFECÇÃO POR LEISHMANIA (VIANNIA) BRAZILIENSIS EM CAMUNDONGOS BALB
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Resumen en portugues
A leishmaniose cutânea causada por Leishmania (Viannia) braziliensis é a forma clínica de leishmaniose mais difundida nas Américas. Migonemyia migonei é uma espécie de flebotomíneo amplamente distribuída no Brasil e tem sido implicada como vetor de L. (V.) braziliensis. No presente estudo, investigamos os efeitos do homogeneizado de glândula salivar (SGH) de Mg. migonei no curso da infecção por L. (V.) braziliensis em camundongos BALB/c. Os camundongos foram separados em quatro grupos (seis por grupo): CTRL (camundongos não infectados); SGH (camundongos inoculados com SGH de Mg. migonei); SGH+LEISH (camundongos inoculados com SGH de Mg. migonei mais promastigotas de L. (V.) braziliensis); LEISH (camundongos inoculados com promastigotas de L. (V.) braziliensis). Os camundongos foram acompanhados por 8 semanas e a resposta imune foi avaliada por citometria de fluxo no final do experimento. A análise da produção de citocinas por células esplênicas estimuladas com SGH 0,5, SGH 0,25 de Mg. migonei ou estimuladas com antígeno solúvel de Leishmania (LSA) demonstrou que após estímulo com SGH 0,25, a produção de IL-17A e TNF não foi sustentada no grupo SGH, que apresentou níveis decrescentes destas citocinas após 5 dias em comparação com 3 dias de incubação. Analisando a produção de citocinas após a estímulo com LSA, observamos níveis mais baixos de IL-17A no grupo SGH após 5 dias em comparação com 3 dias. O mesmo foi observado para IFN-γ no grupo SGH. No entanto, os níveis de TNF foram significativamente mais elevados no grupo LEISH após 5 dias em comparação com 3 dias. Entre os camundongos do grupo SGH+LEISH e LEISH, três animais em cada grupo desenvolveram lesões cutâneas na cauda, o tamanho médio da lesão foi significativamente maior no grupo LEISH. Nossos achados sugerem que SGH de Mg. migonei pode modular a resposta imune em BALB/c sob estímulo do antígeno de L. (V.) braziliensis, refletido pela baixa produção ou diminuição precoce de citocinas pró-inflamatórias em culturas de células esplênicas. Nossos dados também sugerem que a saliva de Mg. migonei pode reduzir o tamanho da lesão em em camundongos BALB/c, mas pesquisas adicionais com um tamanho de amostra maior são necessárias para confirmar essa hipótese.
Resumen en ingles
Cutaneous leishmaniasis caused by Leishmania (Viannia) braziliensis is the most widespread clinical form of leishmaniasis in the Americas. Migonemyia migonei is a widely distributed phlebotomine sand fly species in Brazil and has been implicated as a vector for L. (V.) braziliensis. In the present study, we investigated the effects of salivary gland homogenates (SGH) of Mg. migonei on the course of L. (V.) braziliensis infection in BALB/c mice. Mice were separated into four groups (six mice per group): CRTL (uninfected mice); SGH (mice inoculated with Mg. migonei SGH); SGH+LEISH (mice inoculated with Mg. migonei SGH plus L. (V.) braziliensis promastigotes); LEISH (mice inoculated with L. (V.) braziliensis promastigotes). Mice were followed up for 8 weeks and the cellular immune response was evaluated by flow cytometry at the end of the experiment. Analysis of cytokine production by splenic cells stimulated with 0.5 SGH, 0.25 SGH of Mg. migonei or L. (V.) braziliensis soluble antigen stimulation (LSA) demonstrated that upon stimulation with SGH 0.25, the production of IL-17A and TNF was not sustained in the SGH group, with decreasing levels of these cytokines after 5 days compared to 3 days of incubation. Analyzing the production of cytokines after LSA stimulation, we observed lower levels of IL-17A in the SGH group after 5 days compared to 3 days. The same was observed for IFN-γ in the SGH group. Yet, the levels of TNF were significantly higher in the LEISH group after 5 days compared to 3 days. Among SGH+LEISH and LEISH mice, three animals in each group developed skin lesions on the tail, the mean lesion size was significantly higher in the LEISH group. Our study suggests that Mg. migonei SGH may modulate BALB/c immune response, as reflected by the low production or early decrease of pro-inflammatory cytokines in splenic cell cultures following stimulation with L. (V.) braziliensis antigen. Our data also suggest that Mg. migonei saliva may reduce the lesion size in BALB/c mice, but further research with a larger sample size is needed to confirm this hypothesis.
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