Avaliação do potencial imunoprofilático e imunoterápico de novos antígenos recombinantes de leishmania infantum: uma abordagem em leishmaniose visceral canina

Abstract

Imunoprofiláticos/imunoterápicos seguros e eficazes contra a leishmaniose visceral canina (LVC) têm sido apontados como meios que podem controlar esta doença. Assim, o objetivo do estudo foi avaliar, in vitro, o potencial de novas proteínas recombinantes de L. infantum, Lci10, Lci13, Q1 e Q5 para vacinologia na LVC. Após exames clínicos, parasitológicos, sorológicos e moleculares, cães provenientes de Goiana, Caruaru e Camaragibe (PE) foram inseridos nos grupos infectados (CI) e não infectados (CNI). Seis e sete cães por grupo foram empregados para a avaliação de citocinas por expressão gênica (qPCR) e por síntese (Citometria de Fluxo - CF), respectivamente. PBMCs foram estimuladas com os antígenos (concentrações previamente definidas), com o antígeno solúvel de L. infantum (ASL) ou sem estímulo (SE). Pela CF as proporções das citocinas Th1/Th2 foram determinadas. A produção do Óxido Nítrico (NO) foi mensurada nos sobrenadantes das culturas. A análise comparativa revelou que a Lci13 promoveu no grupo CNI um aumento significativo na expressão de IFN-γ em relação ao ASL (p = 0,0362), e também quando comparado ao grupo CI (p = 0,0028), além de expressão negativa para TGF-β (Th2). A Lci13 induziu ainda uma maior produção de NO em relação à amostra SE no grupo CNI, indicando assim um potencial imunoprofilático. Para Q1, as razões IFN-γ/IL-4 e TNF/IL-4 obtidas em CNI evidenciaram valores significativamente maiores em relação ao ASL (p = 0,0259 e 0,05, respectivamente), além de uma razão IFN-γ/IL-4 maior em relação ao grupo CI (p = 0,0347), dessa forma indicando um perfil imunoprofilático sugestivo. A Lci10 indica necessidade de análises complementares in vitro para definição do potencial protetor. A Q5 não apresentou um potencial protetor em nenhuma das análises. Os resultados indicam a Lci13 e a Q1 para a realização de ensaios préclínicos, a fim de determinar seus efeitos de proteção e reatogenicidade para vacinologia. A Lci13 induziu ainda uma maior produção de NO em relação à amostra SE no grupo CNI, indicando assim um potencial imunoprofilático. Para Q1, as razões IFN-γ/IL-4 e TNF/IL-4 obtidas em CNI evidenciaram valores significativamente maiores em relação ao ASL (p = 0,0259 e 0,05, respectivamente), além de uma razão IFN-γ/IL-4 maior em relação ao grupo CI (p = 0,0347), dessa forma indicando um perfil imunoprofilático sugestivo. A Lci10 indica necessidade de análises complementares in vitro para definição do potencial protetor. A Q5 não apresentou um potencial protetor em nenhuma das análises. Os resultados indicam a Lci13 e a Q1 para a realização de ensaios préclínicos, a fim de determinar seus efeitos de proteção e reatogenicidade para vacinologia.