Polimorfismo genético, expressão de mRNA na mucosa intestinal e níveis circulantes da molécula HLA-G e citocinas IL-10, TNF, e IFN-γ em pacientes com Doença de Crohn e Retocolite Ulcerativa

Abstract

O HLA-G é uma molécula imunomoduladora, cuja variação nos sítios das regiões 5’reguladora (5’URR) e 3’não-traduzida (3’UTR) foram associadas a diversas patologias, incluindo doenças inflamatórias. A Doença de Crohn (DC) e a Retocolite Ulcerativa (RCU) são caracterizadas por processos inflamatórios crônicos no trato gastrointestinal, com aumento de TNF e IFN-γ em DC e de IL-10 em RCU. Neste estudo, foram avaliados pacientes com DC e RCU quanto a: (i) frequência de polimorfismos nas regiões 5’URR e 3’UTR do gene HLA-G, região promotora do TNF e IL10 e íntron 1 do IFNG; (ii) influência destes loci na expressão de mRNA de mucosa e proteína no plasma; (iii) avaliação entre a expressão das moléculas em relação ao grau de inflamação de mucosa. O estudo genético foi realizado por sequenciamento de DNA de 71 pacientes com DC, 140 com RCU e 364 indivíduos saudáveis e o estudo de expressão na mucosa por qPCR em 28 pacientes com DC e 69 com RCU. Em RCU, o alelo TNF-863A foi associado ao risco à doença (P=0,025), e a expressão tecidual de TNF foi associada ao grau de inflamação de mucosa em estudos não pareados (P=0,061) e em pareados (P=0,005). Em DC, a presença do alelo IL10-1082A no modelo dominante aumenta em 4x o risco para DC (P=0,014). O microssatélite IFNG+875(CA)n em homozigose está relacionado a proteção a DC e RCU, sendo a expressão de mRNA de IFNG maior nos pacientes com DC (P=0,028), porém a expressão em pacientes heterozigotos é semelhante em ambas doenças. Em relação ao HLAG, 10 sítios da região 5’URR estão associados a proteção à RCU, dos quais o haplótipo -762TT, -716G-G e -689G-G apresentaram menor expressão de HLA-G5 (P=0,036). Nos pacientes com DC foi observado menor frequência do genótipo +2960(14pb)In-In da região 3’UTR (P=0,005). A expressão de mRNA de HLA-G no estudo pareado é maior nas amostras mais inflamadas em DC e RCU. Diferentes variantes genéticas estão associadas ao desenvolvimento do processo inflamatório crônico de mucosa na DC e RCU .