Caracterização de anofelinos em duas regiões de transmissão de malária (Brasil e Cabo Verde): identificação de espécies, infecção vetorial, detecção de genes de resistência a inseticidas e análise da variabilidade genética

Abstract

Mosquitos do gênero Anopheles são considerados os únicos vetores responsáveis pela transmissão do Plasmodium spp., agente etiológico da malária, a nível global. Na África, a malária é distribuída por quase todas as regiões, incluindo Cabo Verde - país situado na África ocidental. Nas Américas, o Brasil é o segundo país que mais reporta casos da doença, com dois cenários epidemiológicos distintos: alta endemicidade (região Amazônica) e sem endemicidade (na região extra-amazônica). Em ambos os continentes, uma das principais estratégias de combate à doença é o controle de vetores através do uso de inseticidas químicos. No entanto, o uso indiscriminado dos inseticidas tem ocasionado a seleção de genes que conferem resistência em mosquitos, o que dificulta o controle dessas populações. Sendo assim, o conhecimento da estrutura genética de anofelinos vetores e a detecção de alelos de resistência são essenciais para fundamentar a tomada de decisões em programas de controle vetorial. Este estudo teve como objetivo avaliar a circulação de vetores da malária, identificar a infecção natural por Plasmodium spp., diagnosticar a ocorrência de alelos que conferem resistência a inseticidas químicos e estimar a variabilidade genética em anofelinos de duas regiões: cidade da Praia, Cabo Verde (região endêmica) e município do Conde-PB, Brasil (sem endemicidade). A identificação de anofelinos usando IGS (espaçadores intergênicos) revelou um total de 235 espécimes de Anopheles arabiensis coletadas em Cabo Verde. No Conde, 323 espécimes de Anopheles foram identificadas molecularmente, usando DNA barcoding: An. aquasalis (135), An. minor (62), An. triannulatus (32), An. albitarsis s.l (30), An. argyritarsis (18), An. peryassui (15), An. oswaldoi (5), An. braziliensis (3), An. sawyeri (3) e Anopheles spp. (20). A investigação molecular da infecção por Plasmodium spp. foi realizada em 312 mosquitos fêmeas de Anopheles coletados no Conde-PB, resultando em nenhuma amostra positiva para Plasmodium. A genotipagem dos genes de resistência (Nav, GSTE2 e ace-1) e a variabilidade genética (COI, ND5) foram realizadas para as espécies An. arabiensis coletadas em Cabo Verde e para três potenciais vetores (An. albitarsis s.l, An. aqusalis e An. argyritaris) coletados no município do Conde. Não foram encontradas SNPs nos genes de resistência, com exceção do gene Nav que revelou a presença dos alelos L1014S/F na população de An. arabiensis coletada em Cabo Verde, com frequências de 0,15 e 0,17 em duas localidades analisadas. De forma geral, o estudo da diversidade genética local dos anofelinos coletados nas duas regiões, revelou baixa diversidade genética, com alto Nm e baixos valores de Fst. Uma análise global, comparando populações de Cabo Verde com as disponíveis em banco de dados para países africanos, revelou altos valores de Fst e baixos Nm, resultando em alta diferenciação genética e baixo fluxo gênico. Os dados apresentados neste estudo apontam para a necessidade de uma continua vigilância entomológica e molecular dos Anopheles vetores presente nas duas regiões de estudo, afim de orientar as estratégias a serem empregadas nos programas de controle locais .