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DissertaçãoDireito Autoral
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CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR DOS COXSACKIEVÍRUS B5 ASSOCIADOS A INFECÇÕES NO SISTEMA NERVOSO CENTRAL NO BRASIL
Variação Genética
Infecções por Coxsackievirus
Infecções do Sistema Nervoso Central
Machado, Raiana Scerni | Data do documento:
2021
Autor(es)
Orientador
Membros da banca
Afiliação
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Resumo
Os enterovírus humanos (EV) são vírus de RNA, não envelopados, pertencentes à família Picornaviridae. Embora a maioria das infecções por EV sejam assintomáticas e autolimitadas, esses vírus podem causar um amplo espectro de apresentações clínicas, incluindo síndromes graves do sistema nervoso central (SNC). O coxsackievírus B5 (CVB5) é um dos tipos de EV mais prevalentes em humanos e epidemias causadas por esses vírus são relatadas anualmente em todo o mundo. O objetivo deste estudo foi determinar a diversidade genética dos CVB5 associados a infecções no sistema nervoso central no Brasil. Para isso, foram utilizados isolados de CVB5 obtidos a partir de amostras de líquido cefalorraquidiano e fezes de pacientes com meningite asséptica e paralisia flácida aguda, respectivamente. Foi realizada a reinoculação das amostras em linhagens celulares (HEp2C e RD). Em seguida, foi realizada a extração do RNA, síntese do cDNA e PCR para amplificação da principal proteína do capsídeo viral (VP1). Posteriormente, foi realizada a reação de sequenciamento baseada no método de Sanger e a análise filogenética das sequências obtidas. De 2005 a 2019, 58 isolados de CVB5 foram identificados no âmbito do Programa Brasileiro de Vigilância da Poliomielite. As análises das sequências de VP1 revelaram dois genogrupos CVB5, A e B, circulando no Brasil. A análise filogenética sugeriu a circulação do genogrupo A (subgenogrupo A4) a partir de 2017 no país, enquanto os isolados de CVB5 pertencentes ao genogrupo B (subgenogrupo B2) antes de 2017 A análise baseada nas sequências de aminoácidos mostrou substituições importantes em resíduos conhecidos por desempenhar papéis importantes no tropismo viral. Este trabalho fornece informações valiosas sobre a diversidade de CVB5 associada à infecção do SNC no Brasil, apontando para a importância da vigilância dos enterovírus não-pólio em doenças neurológicas
Resumo em Inglês
Human enteroviruses (EV) are non-enveloped RNA viruses belonging to the Picornaviridae family. Although most EV infections are asymptomatic and self-limiting, these viruses can cause a wide spectrum of clinical outcomes, including severe central nervous system (CNS) syndromes. Globally, coxsackievirus B5 (CVB5) is one of the most prevalent EV-types in humans and epidemics caused by these viruses are reported annually. The aim of this study was to determine the genetic diversity of CVB5 associated with infections in the central nervous system in Brazil. For this purpose, assays were performed with CVB5 isolates obtained from cerebrospinal fluid and stool samples of aseptic meningitis and acute flaccid paralysis patients, respectively. Specimens were inoculated in cell lines (HEp2C and RD). After cytopathic effect (CPE), RNA extraction, cDNA synthesis and PCR were performed to amplify the main viral capsid protein (VP1). Subsequently, we performed the sequencing reaction based on the Sanger method and phylogenetic analysis. From 2005 to 2019, 58 isolates of CVB5 were identified in the scope of the Brazilian Poliomyelitis Surveillance Program. VP1 sequence analyzes revealed two CVB5 genogroups, A and B, circulating in Brazil A. Phylogenetic analysis suggested the circulation of genogroup A (subgenogroup A4) from 2017 in the country, while CVB5 isolates belonging to genogroup B (subgenogroup B2) showed a circulation prior to 2017. Network analysis based on deduced amino acid sequences showed important substitutions in residues known to play critical roles in viral host tropism, cell entry and viral antigenicity. This work provides valuable information on CVB5 diversity associated with CNS infection in Brazil, pointing to the importance of surveillance of non-polio enteroviruses in neurological diseases
DeCS
EnterovirusVariação Genética
Infecções por Coxsackievirus
Infecções do Sistema Nervoso Central
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