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RESPOSTA IMUNE POR SUBCLASSES DE IGG À DIFERENTES PROTEÍNAS MICOBACTERIANAS
Lins, Nidai de Barbara Moreira da Silva | Data do documento:
2017
Autor(es)
Afiliação
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Resumo
A Organização Mundial da Saúde estima que, em 2014, a tuberculose (TB) foi responsável por cerca de 10,4 milhões de casos novos e 1,5 milhões de óbitos em todo o globo. Embora os casos de TB venham diminuindo, o número de indivíduos latentemente infectados (LTBI) é alto, formando um importante reservatório de bacilos. Os mecanismos da manutenção de uma LTBI ou progressão para doença ainda não estão completamente elucidados. A resposta imune mediada por células com produção de interferon gama (IFN-\03B3), dentre outras citocinas, é crucial na resposta contra a TB. Embora anticorpos sejam produzidos contra diferentes antígenos micobacterianos na TB, são considerados não protetores. O fato é que ainda pouco se sabe do seu papel no balanço da resposta imune nas diferentes fases da infecção, particularmente às subclassses de IgG. Assim, o presente estudo objetiva investigar a imunoreatividade, por teste imunoenzimático (ELISA) de subclasses de IgG, frente aos antígenos micobacterianos associados à fase de latência (Rv2031c, Rv2628, Rv2034, Rv2029c), à infecção (ESAT6:CFP10 e Rv3353) e uma quimera proteica com potencial de diagnóstico da LTBI, recém-sintetizada por nosso grupo (PstS1(285-374):CFP-10). Utilizando a técnica de ELISA indireto, foram analisadas 115 amostras de plasma, sendo 24 de casos de TB confirmada e 91 de contatos recentemente expostos (rCt) a TB pulmonar bacilíferos Os rCt foram classificados pels teste cutâneo à tuberculina (TCT) e pelo ensaio de liberação de IFN-\03B3 de longa estimulação (LSA) em: LTBI (TCT/LSA+ , n=24); provável LTBI (TCT/LSA discordantes, n=42); e controles não-infectados (TCT/LSA¯ , n=25). Pacientes com TB ativa apresentam um perfil imunodominante (p<0,05) de IgG1-ESAT6:CFP10, PstS1(285- 374):CFP-10, Rv2628, Rv3353, Rv2034 e Rv2029. Interessantemente, significativa baixa-produção de IgG2-PstS1(285-374):CFP10, IgG2-Rv3353 e IgG3-Rv2034 (p<0,05) foi observada nos TB vs rCt sugerindo uma possível função protetora nos rCt-LTBI. De fato, a alta produção de IgG3-Rv2034 mostrou excelente discriminação entre LTBI vs TB (sensibilidade [S]=100%; especificidade [E]=91%). A combinatória de IgG1-ESAT6:CFP10>151/IgG2-Rv3353<51 mostrou potencial imunodiagnóstico na TB (S=88%; E=100%). Entretanto, embora com menor Sp, o uso de resultados combinatórios também foi mais promissor na detecção de LTBI (S = 80%, Sp = 69,5%), do que o uso de antígenos único (S <48%, Sp <91%). Estudos adicionais serão necessários para corroborar a potencial utilização das combinatória na detecção de TB ativa e o papel da resposta IgG2-PstS1(285-374):CFP10, -Rv3353 e IgG3-Rv2034 na proteção da progressão de LTBI. O presente estudo demonstrou que a resposta por subclasses de IgG pode ser dinâmica na TB/infecção, de acordo com a especificidade para os antígenos alvos, e pela primeira vez isotipos de IgG foram avaliados para os antígenos PstS1(285-374):CFP10 and Rv2034.
Resumo em Inglês
According to the World Health Organization, in 2014, TB caused approximately 10.4 million new cases and 1.5 million deaths worldwide. Although active TB cases are declining worldwide, the number of latent TB infected (LTBI) is high, composing an important reservoir of bacilli. The mechanisms involved in the maintenance of a LTBI or progression to disease have not yet been fully understood. Cell-mediated immune response with interferon gamma (IFN-\03B3) production, among other cytokines, is crucial in the response to TB. Although antibodies are also produced against different mycobacterial antigens in TB, there is still a gap in the knowledge about their role in immune response balance at different stages of infection, particularly IgG subclasses. Thus, the present study aims to investigate the immunoreactivity, by titration of IgG subclasses, against different mycobacterial antigens, latency-associated (Rv2031c, Rv2628, Rv2034 and Rv2029c), to the infection (ESAT6:CFP10 and Rv3353), and to a new chimera with the diagnostic potential of LTBI recently synthesized by our group (PstS1(285-374): CFP-10). Using the indirect ELISA technique, 115 plasma samples were analyzed, 24 of which were from confirmed cases of TB and 91 from recently close contacts (rCt) exposed to a pulmonary TB The rCt were classified according to: the tuberculin skin test (TST) and the long-term IFN-\03B3 release assay (LSA) in: LTBI (TST/LSA+ , n=24); Probable LTBI (TST/LSA, discordant n=42); and uninfected controls (TST/LSA\2013, n=25). Patients with active TB showed an immunodominant profile of (p<0.05) IgG1-ESAT6:CFP10, Rv2628, PstS1(285- 374):CFP10, Rv3353, Rv2034, Rv2029. Interestingly, significant low-production of IgG2- PstS1(285-374):CFP10, IgG2-Rv3353 and IgG3-Rv2034 (p <0.05) was observed in TB vs rCt suggesting a possible protective function of this antibodies in rCt-LTBI. In fact, the high production of IgG3-Rv2034 showed excellent discriminatory power between LTBI vs TB (sensitivity [S] = 100%, specificity [Sp] = 91%). The combinatoriy of IgG1-ESAT6: CFP10>151/IgG2-Rv3353<51 results showed immunodiagnostic potential for TB (S = 88%; Sp = 100%). Although with lower Sp, the use of combinatorial results were also more promising in the detection of LTBI (S = 80%, Sp = 69.5%), than using single antigens (S <48%, Sp <91%). Further studies are needed to corroborate the potential use of the combinatorial IgG1-ESAT6: CFP10 / IgG2-Rv3353 in the detection of active TB and the role of the IgG2-PstS1(285-374):CFP10 and -Rv3353 and IgG3-Rv2034 response in the protection of LTBI progression. The present study demonstrated that IgG subclasses response may be dynamic according to Sp for target antigens, and for the first time presented the IgG subtypes profile for the antigens PstS1(285-374):CFP10 and Rv2034.
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