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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/49817
ANTIGEN PRODUCTION AND DEVELOPMENT OF AN INDIRECT ELISA BASED ON THE NUCLEOCAPSID PROTEIN TO DETECT HUMAN SARS‑COV‑2 SEROCONVERSION
Ensayo de Inmunoadsorción Enzimática
Proteínas de la Nucleocápside
Author
Conzentino, Marcelo S.
Forchhammer, Karl
Souza, Emanuel Maltempi de
Pedrosa, Fábio O.
Nogueira, Meri B.
Raboni, Sônia M.
Rego, Fabiane G. M.
Zanette, Dalila Lucíola
Aoki, Mateus Nóbrega
Nardin, Jeanine M.
Fornazari, Bruna
Morales, Hugo M. P.
Celedon, Paola Alejandra Fiorani
Lima, Carla V. P.
Mattar, Sibelle B.
Lin, Vanessa H.
Morello, Luis Gustavo
Marchini, Fabrício Klerynton
Reis, Rodrigo A.
Huergo, Luciano F.
Forchhammer, Karl
Souza, Emanuel Maltempi de
Pedrosa, Fábio O.
Nogueira, Meri B.
Raboni, Sônia M.
Rego, Fabiane G. M.
Zanette, Dalila Lucíola
Aoki, Mateus Nóbrega
Nardin, Jeanine M.
Fornazari, Bruna
Morales, Hugo M. P.
Celedon, Paola Alejandra Fiorani
Lima, Carla V. P.
Mattar, Sibelle B.
Lin, Vanessa H.
Morello, Luis Gustavo
Marchini, Fabrício Klerynton
Reis, Rodrigo A.
Huergo, Luciano F.
Affilliation
Universidade Federal do Paraná. Setor Litoral. Matinhos, PR, Brasil.
Interfakultäres Institut für Mikrobiologie und Infektionsmedizin der Eberhard-Karls. Universität Tübingen. Tübingen, Germany.
Universidade Federal do Paraná. Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular. Curitiba, PR, Brasil.
Universidade Federal do Paraná. Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular. Curitiba, PR, Brasil.
Universidade Federal do Paraná. Hospital das Clínicas. Curitiba, PR, Brasil.
Universidade Federal do Paraná. Hospital das Clínicas. Curitiba, PR, Brasil.
Universidade Federal do Paraná. Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Curitiba, PR, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas. Curitiba, PR, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas. Curitiba, PR, Brasil.
Hospital Erasto Gaertner. Curitiba, PR, Brasil.
Hospital Erasto Gaertner. Curitiba, PR, Brasil.
Hospital Erasto Gaertner. Curitiba, PR, Brasil.
Instituto de Biologia Molecular do Paraná. Curitiba, PR, Brasil.
Instituto de Biologia Molecular do Paraná. Curitiba, PR, Brasil.
Instituto de Biologia Molecular do Paraná. Curitiba, PR, Brasil.
Instituto de Biologia Molecular do Paraná. Curitiba, PR, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas. Curitiba, PR, Brasil. / Instituto de Biologia Molecular do Paraná. Curitiba, PR, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas. Curitiba, PR, Brasil. / Instituto de Biologia Molecular do Paraná. Curitiba, PR, Brasil.
Universidade Federal do Paraná. Setor Litoral. Matinhos, PR, Brasil.
Universidade Federal do Paraná. Setor Litoral. Matinhos, PR, Brasil.
Interfakultäres Institut für Mikrobiologie und Infektionsmedizin der Eberhard-Karls. Universität Tübingen. Tübingen, Germany.
Universidade Federal do Paraná. Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular. Curitiba, PR, Brasil.
Universidade Federal do Paraná. Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular. Curitiba, PR, Brasil.
Universidade Federal do Paraná. Hospital das Clínicas. Curitiba, PR, Brasil.
Universidade Federal do Paraná. Hospital das Clínicas. Curitiba, PR, Brasil.
Universidade Federal do Paraná. Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Curitiba, PR, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas. Curitiba, PR, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas. Curitiba, PR, Brasil.
Hospital Erasto Gaertner. Curitiba, PR, Brasil.
Hospital Erasto Gaertner. Curitiba, PR, Brasil.
Hospital Erasto Gaertner. Curitiba, PR, Brasil.
Instituto de Biologia Molecular do Paraná. Curitiba, PR, Brasil.
Instituto de Biologia Molecular do Paraná. Curitiba, PR, Brasil.
Instituto de Biologia Molecular do Paraná. Curitiba, PR, Brasil.
Instituto de Biologia Molecular do Paraná. Curitiba, PR, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas. Curitiba, PR, Brasil. / Instituto de Biologia Molecular do Paraná. Curitiba, PR, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas. Curitiba, PR, Brasil. / Instituto de Biologia Molecular do Paraná. Curitiba, PR, Brasil.
Universidade Federal do Paraná. Setor Litoral. Matinhos, PR, Brasil.
Universidade Federal do Paraná. Setor Litoral. Matinhos, PR, Brasil.
Abstract
Serological assays are important tools to identify previous exposure to SARS-CoV-2, helping to track COVID-19 cases and determine the level of humoral response to SARS-CoV-2 infections and/or immunization to future vaccines. Here, the SARS-CoV-2 nucleocapsid protein was expressed in Escherichia coli and purifed to homogeneity and high yield using a single chromatography step. The purifed SARS-CoV-2 nucleocapsid protein was used to develop an indirect enzyme-linked immunosorbent assay for the identifcation of human SARS-CoV-2 seroconverts. The assay sensitivity and specifcity were determined analyzing sera from 140 RT-qPCR-confrmed COVID-19 cases and 210 pre-pandemic controls. The assay operated with 90% sensitivity and 98% specifcity; identical accuracies were obtained in head-to-head comparison with a commercial ELISA kit. Antigen-coated plates were stable for up to 3 months at 4 °C. The ELISA method described is ready
for mass production and will be an additional tool to track COVID-19 cases.
Keywords in Spanish
Pruebas InmunológicasEnsayo de Inmunoadsorción Enzimática
Proteínas de la Nucleocápside
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