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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/4113
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DissertaçãoDireito Autoral
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O IMPRINT COMO MÉTODO PARA DETECÇÃO DE LEPTOSPIRA SSP
Chagas Júnior, Adenizar Delgado das | Data do documento:
2009
Autor(es)
Orientador
Coorientador
Membros da banca
Afiliação
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil.
Resumo
Na determinação da eficácia de novas candidatas à vacina para leptospirose, o marcador primário considerado é a mortalidade, e um marcador secundário importante é a indução de uma imunidade estéril. Entretanto, a avaliação da imunidade estéril é dificultada pelo tempo demandado e pela complexidade de métodos como o isolamento pela cultura. Neste estudo, foi avaliado o uso do método do imprint (ou touch preparation) na detecção da presença de leptospiras em tecidos de hamsters infectados com L. interrogans sorovar Copenhageni. Comparado com a cultura, o imprint demonstrou igual ou melhor detecção de leptospiras em amostras de rim, fígado, pulmão e sangue coletadas após a infecção obtendo uma concordância geral boa (κ = 0.61). Além disso, na avaliação de hamsters imunizados com uma proteína recombinante de Leptospira candidata à vacina e subsequente desafio com leptospiras patogênicas, a concordância entre a cultura e o imprint foi alta (κ = 0.84). Estes achados indicam que o imprint é um método rápido para a observação direta de Leptospira spp. e que pode ser facilmente aplicado na
avaliação de animais infectados experimentalmente com leptospiras e na
determinação de imunidade esterilizante durante avaliações de potenciais
candidatas à vacina.
Resumo em Inglês
In determining the efficacy of new vaccine candidates for leptospirosis the primary endpoint is death and an important secondary endpoint is sterilizing immunity. However, evaluation of this endpoint is often hampered by the time consuming demands and complexity of methods such as culture isolation (CI). In this study, we evaluated the use of an imprint (or touch preparation) method (IM) in detecting the presence of leptospires in tissues of hamsters infected with L. interrogans serovar Copenhageni. Compared to CI, the IM exhibited equal or improved detection of leptospires in kidney, liver, lung and blood samples collected post-infection and the overall concordance was good (κ = 0.61). Furthermore, in an evaluation of hamsters immunized with a recombinant Leptospira protein-based vaccine candidate and subsequently challenged with leptospires, the agreement between the CI and IM was very good (κ = 0.84). These finding indicate that the IM is a rapid method for the direct observation of Leptospira spp. that can be readily applied to evaluating Leptospira infection in experimental animals and determining sterilizing immunity when screening potential vaccine candidates.
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