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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/40066
PADRONIZAÇÃO DE SORO ANTIRRÁBICO DE REFERÊNCIA O UTILIZANDO O ENSAIO DE VIRUSNEUTRALIZAÇÃO EM CÉLULAS BHK-21
Freitas, Jéssica Ferreira de Souza | Data do documento:
2019
Autor(es)
Orientador
Coorientador
Membros da banca
Afiliação
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Resumo
Um lote de soro antirrábico foi produzido na forma liofilizada pelo Instituto Butantan (São Paulo – BR) e doado ao Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde (INCQS/Fiocruz - Rio de Janeiro – BR) como candidato para estabelecimento de um novo padrão nacional de referência. O presente estudo foi desenvolvido para padronizar a potência virusneutralizante do lote candidato para o vírus rábico, utilizando cultivo de células. O teste utilizado para determinar a potência do soro foi o Ensaio de Potencia de Neutralização Viral (EPNV) em células BHK-21 em placas de 96 poços. Foram realizados quatro ensaios em dias diferentes. Os soros candidatos foram testados frente ao 2º padrão internacional de imunoglobulina antirrábica (NIBSC – UK), todos diluídos para conter aproximadamente 1 UI/mL, em quatro diluições cada e em três replicatas. Os resultados foram calculados utilizando o software CombiStats do European Directorate for the Quality of Medicines and HealthCare (EDQM) para obtenção da dose efetiva 50% (DE50) e da potência em unidades internacionais (UI/frasco). Os resultados foram combinados para obtenção da média semi ponderada que foi considerada o título do produto.
Resumo em Inglês
A batch of rabies antiserum was produced in the lyophilized form by the Butantan Institute and donated to the National Institute of Quality Control in Health (INCQS / Fiocruz - Rio de Janeiro – BR) as a candidate for establishment as a new national reference standard. The present study was conducted to standardize the batch using virus-neutralizing potency test in cell culture. The test used for potency determination was the Virus Neutralization Potency Assay (VNPA) in BHK-21 cells in 96-well plates. Four assays were performed on different days. The candidate serum was tested against the 2nd International Standard of rabies Immunoglobulin (NIBSC - UK), all diluted to contain approximately 1 IU/mL, in four dilutions each and in three replicates. The results were calculated using the CombiStats software from the European Directorate for the Quality of Medicines and HealthCare (EDQM) to obtain the effective dose 50% (ED50) and the potency in international units (IU/vial). The results were combined to obtain the mean that was considered the title of the candidate.
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