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EFEITO DAS REDES EXTRACELULARES DE NEUTRÓFILOS SOBRE A INFECÇÃO PELA HIV-1 EM MACRÓFAGOS
HIV-1
Neutrófilos
Imunidade inata
Neutrophil extracellular traps
Mojoli Le Quesne, Andrés Hernán | Fecha del documento:
2018
Director
Afiliación
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Resumen en portugues
Os neutrófilos liberam Redes Extracelulares (NETs, do inglês Neutrophil Extracellular Traps) após interação com microrganismos e produtos fisiológicos ou sintéticos, entre outros. As NETs são constituídas por cromatina descondensada complexada com proteínas citoplasmáticas e nucleares, algumas delas com propriedades microbicidas. Como as redes extracelulares, liberadas no microambiente tecidual, podem modular o funcionamento das células-alvo do HIV-1, nosso objetivo foi verificar se as NETs poderiam modificar a replicação do HIV-1 em macrófagos. Neste estudo, nós vimos que a exposição de macrófagos infectados pelo HIV-1 às NETs resultou em significativa inibição da replicação viral. Observamos que tanto NETs individuais quanto pools destas estruturas apresentaram este efeito inibitório, que também ocorreu quando as NETs foram adicionadas aos macrófagos antes da infecção. O efeito anti-HIV-1 foi independente de outros fatores solúveis liberados pelos neutrófilos ativados, mas condicionado à integridade molecular das NETs, pois o tratamento destas estruturas com protease ou DNase anulou esse efeito. Vimos que a elastase neutrofílica (NE) é um componente crítico neste fenômeno, tendo em vista que a sua inibição (inibidor farmacológico) aboliu o efeito anti-HIV-1 das NETs, e que a NE purificada reproduziu este efeito antiviral As NETs induziram a produção de RANTES e MIP-1\03B2 por macrófagos, sugerindo que estas \03B2-quimiocinas contribuem para o efeito anti-HIV-1 destas redes. Tanto as NETs quanto a NE diminuíram a síntese de transcritos unspliced do HIV-1, o que pode também explicar a queda da produção de vírions pelos macrófagos infectados. Ainda, vírions remanescentes liberados pelos macrófagos infectados expostos às NETs apresentaram significativa queda da sua infectividade. Em estudos com amostras clínicas, observamos que neutrófilos de pacientes infectados pelo HIV-1 liberam NETs após estimulo com IL-8, e que moléculas componentes das NETs (DNA e elastase) estão presentes no plasma desses pacientes. Finalmente, nossos resultados mostram que as NETs exercem um potente efeito inibitório sobre a replicação do HIV-1 em macrófagos, e sugerem que este mecanismo de imunidade inata é um importante fator endógeno de controle da infecção pelo HIV-1.
Resumen en ingles
Neutrophils release extracellular traps (NETs) after interaction with microorganisms and physiological or synthetic products, among others. NETs consist of decondensed chromatin complexed with cytoplasmic and nuclear proteins, some of them with microbicidal properties. Because NETs are released in the tissue microenvironment and they can modulate the functioning of HIV-1 target cells, we aimed to verify whether NETs could modify HIV-1 replication in macrophages.
In this study, we found that exposure of HIV-1-infected macrophages to NETs resulted in significant inhibition of viral replication. We observed that both, individual NETs or pools of these structures, present this inhibitory effect, which also occurred when NETs were added to macrophages before infection. The anti-HIV-1 effect was independent of others soluble factors released by the activated neutrophils, but otherwise dependent of the molecular integrity of NETs, since treatment of these structures with protease or DNase abolished this effect. We observed that neutrophil elastase (NE) is a critical component of this phenomenon, since its inhibition by a pharmacological inhibitor abolished the NETs anti-HIV-1 effect, and that purified NE reproduced this antiviral effect. NETs induced the production of RANTES and MIP-1β by macrophages, suggesting that these β-chemokines contribute to the anti-HIV-1 effect of these traps. Both, NETs and NE, decreased the synthesis of HIV-1-unspliced transcripts, which also explain the decreased virus production by infected macrophages. Moreover, the residual virions released by infected macrophages treated with NETs showed a significant loss in their infectivity. In studies using clinical samples, we observed that neutrophils from HIV-1 infected patients release NETs after stimulation with IL-8, and that component molecules of NETs (such as DNA and elastase) are present in the plasma of these individuals. Finally, our results show that NETs exert a potent inhibitory effect on HIV-1 replication in macrophages, and suggest that this innate immunity mechanism may control HIV-1 infection in vivo.
Palabras clave en portugues
MacrófagosHIV-1
Neutrófilos
Imunidade inata
Neutrophil extracellular traps
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