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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/33952
AVALIAÇÃO EX VIVO E IN VITRO DA DIVERSIDADE DO REPERTÓRIO VB EM LINFÓCITOS T DE PACIENTES COM LEISHMANIOSE CUTÂNEA LOCALIZADA
Andrade, Jorge Clarêncio Souza | Date Issued:
2001
Advisor
Affilliation
Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina. Salvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil.
Abstract in Portuguese
Muitos trabalhos recentes na literatura em doenças infecciosas, como toxoplasmose, malária, doença de Chagas e filariose avaliaram a relação da diversidade do repertório dos linfócitos TVβ com as respectivas patologias visando identificar deleção ou hiper reatividade clonal implica da na patologia da doença. Nosso objetivo neste trabalho é avaliar o repertório TVβ através de: 1) Caracterizar o repertório TVβ em células do sangue periférico, comparando pacientes com LCL com indivíduos normais; 2) Comparar células do linfonodo com sangue periférico de pacientes com LCL; 3) Avaliar o efeito do estímulo com antígeno de Leishmania braziliensis na expressão de Vβs; 4) Comparar células de voluntários normais antes e após imunização com vacina antileismaniose. Utilizando a técnica de Citometria de Fluxo e usando anticorpos monoclonais anti TCR Vβ, anti CD4 e anti CD8, mostram uma expansão diferencial, oligoclonal, tanto para CD4+ quanto CD8+ e peptídica preferencial. Nesta análise verificamos que o gene Vβ12 foi o mais relacionado com a infecção por Leishmania braziliensis, (dados na tabela abaixo), e que os indivíduos vacinados apresentam uma grande ativação policlonal após 60 dias de imunização, mais evidenciada em CD4+. Expressão do gene V beta 12 de linfócitos T CD4+ e CD8+ na leishmaniose.
Abstract
Several recent studies found ine infectious disease literature (in toxoplasmosis, malaria, filariasis and Chagas’ disease, e.g.) have addressed the relationship of diversity in Vp T cell repertoire looking for deletion or hyper responsive clonal activity at different stages of infection or disease progression. Most have found a policlonal activation. We report here the observation of the T cell Vp repertoire in human cutaneous leishmaniasis (CL), using the following approaches: a) the comparasion of compare VP repertoire of peripheral blood mononuclear cells (PBMC) of CL patients to normal volunteers (NV); b) exploration of compartmentalization, by comparing cells from regional lymph nodes draining the lesion area to PBMC in CL patients; c) the evaluation of in vitro stimulation by Leishmania, by comparing lymph node cells before and after culture with Leishmania braziliensis antigen; d) the evaluation in vivo stimulation, by comparing pre- to post-vaccination responses of NV submitted to anti-leishmania vacciantion (BIOBRÁS, MG-Br). All evaluations were performed by cytofluorimetric analysis (FACSort- BD) using an extended panel of anti-TCR Vp monoclonal antibodies (Immunotech), as well as anti-CD4 and anti-CD8 monoclonal antibodies (BD). Our results indicate an oligoclonal differential and peptide preferential expansion in CD4 and oligoclonal in CD8 populations.
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