Validação de um método molecular para detecção do vírus dengue (DENV) em diferentes estágios de desenvolvimento do Aedes aegypti

Abstract

Apesar dos esforços empregados no controle do Aedes aegypti, tem se observado, no país, o aumento da incidência de dengue e surtos epidêmicos de outras arboviroses transmitidas pelo mesmo vetor, nos últimos anos. A transmissão do DENV na comunidade pode ser evidenciada pela ocorrência de casos da doença e pela detecção do vírus no vetor. O trabalho tem como objetivo validação de um método molecular para detecção do RNA do vírus dengue (DENV-RNA) em diferentes estágios de desenvolvimento do A. aegypti. Amostras de ovos de A. aegypti foram coletas do campo com o uso de “ovitrampas”. Em insetário, os ovos foram eclodidos e acompanhados até o desenvolvimento de alados para confirmação da espécie. Estabeleceu-se então uma colônia de laboratório, onde os mosquitos adultos são mantidos em gaiolas até a infecção experimental pelo DENV. Os insetos ingurgitados com uma mistura de sangue:vírus foram sacrificados em diferentes dias (T0, T4, T8, T12, T15 e T33) para detecção do DENV-RNA por rRT-PCR, bem como larvas L4 e pupas desenvolvidas a partir da colônia de insetos infectados. O DENV-RNA foi extraído em grupos de cinco e individual. As amostras de Adultos-5 e Adulto-1 em T4 e T8 foram indetectáveis. As demais amostras foram extraídas, mas ainda não possuem resultado de detecção. A metodologia de rRT-PCR validada será aplicada para a detecção do DENV em amostra de campo. O desenvolvimento de métodos para detecção precoce do DENV pode auxiliar no controle da doença pela adoção de medidas de bloqueio em um estágio em que a transmissão ainda é inicial.