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GENÔMICA COMPARATIVA DE PROTOZOÁRIOS
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Resumen en portugues
Os protozoários são definidos como organismos eucariotos unicelulares, e apresentam grande diversidade e variedade. Cerca de 200 mil espécies são descritas e quase 10.000 são parasitas. As espécies patogênicas causam doenças como a malária, doença do sono, doença de Chagas, leishmaniose, amebíase e giardíase. Portanto, estudos comparativos entre os protozoários são importantes porque estes podem mostrar semelhanças e diferenças entre essas espécies. A identificação de ortólogos é importante para a categorização funcional de genomas, porque ortólogos tipicamente ocupam o mesmo nicho funcional nos diferentes organismos, enquanto a identificação de parálogos é importante porque eles são submetidos a uma diversificação funcional via duplicação, através dos processos de neofuncionalização e subfuncionalização. A fim de realizar uma análise comparativa de 22 protozoários, 204.624 proteínas não redundantes de Plasmodium, Entamoeba, Trypanosoma, Leishmania, Giardia, Theileria, Toxoplasma, Trichomonas e Cryptosporidium, foram submetidos ao programa OrthoMCL, resultando em 26.101 grupos homólogos. Entre eles, 21.119 grupos são ortólogos, incluindo 7.679 co-ortólogos (grupos que contêm parálogos recentes), e 4982 são parálogos internos. Entre os ortólogos, 348 são compartilhados por todas as 22 espécies e representam o núcleo proteômico de Protozoa
Com este núcleo realizamos uma análise filogenômica, usando os 348 ortólogos concatenados, resultando em uma supermatriz de 328.228 posições, que geraram uma árvore de espécies para os 22 protozoários. Quando inferimos os diferentes Núcleos Proteômicos, Kinetoplastida tem 5.000 grupos ortólogos e 67,92 % (3396/5000) são Kinetoplastida específicos, além disso, 46,29% (1592/3396) destes ortólogos são anotados como "hipotéticos". O núcleo proteômico de Apicomplexa tem 986 grupos ortólogos e 27,82% (224/986) são específicos, enquanto que 40,63% (92 /224) destes são classificados como hipotéticos. O núcleo proteômico de Entamoeba tem 5.915 grupos ortólogos e 75,08% (4441/5915) destes grupos são específicos, sendo que 65,41% (2905/4441) são anotados como hipotéticos. Analisando os parálogos, Trichomonas vaginalis foi a espécie que apresentou o maior número de grupos parálogos internos, 2933, e também mostrou 948 co-ortólogos totalizando 3.881 parálogos. Um aprofundamento da análise na ordem Kinetoplastida mostrou que Trypanosoma cruzi apresenta o número mais elevado de duplicações, totalizando 5.777 parálogos, sendo 4963 co-ortólogos e 814 parálogos internos
Os resultados da montagem e análise de L. amazonensis resultaram 29.670.588 bases e 8802 CDS identificadas. A análise comparativa do gênero Leishmania mostrou que as seis espécies estudadas compartilham 7016 ortólogos, enquanto L. amazonensis e L. mexicana têm o maior número de ortólogos-específicos e L. braziliensis o maior número de paralogos internos. A análise filogenômica mostrou a posição taxonômica esperada de L. amazonensis e juntamente com L. mexicana formando o "complexo Mexicana", além da separação esperada do subgênero Leishmania. Encontramos potenciais proteínas análogas entre L. amazonensis e Homo sapiens e dentro do genoma de L. amazonensis, denominados análogos intragenômicos. Finalmente, a mineração por genes de RNAi mostrou que L. amazonensis , provavelmente não apresenta esta via funcional
Resumen en ingles
Protozoa are defined as single celled eukaryotic organisms showing an extremely
diversity and variety. Approximately 200,000 species are described and nearly
10,000 are parasitic. The pathogenic species cause diseases such as malaria,
sleeping sickness, Ch
agas disease, leishmaniasis, amoebiasis and giardiasis.
Therefore, comparative studies among Protozoa are important because they may
identify similarities and differences in these species. Orthologs identification is central
to functional characterization
of genomes because orthologs typically occupy the
same functional niche in different organisms, while paralogs identification is important
because they undergo a functional diversification by duplication, via the processes of
neofunctionalization and subfu
nctionalization. In order to perform comparative
protozoa analysis, 204,624 non
-
redundant proteins from
Plasmodium
,
Entamoeba
,
Trypanosoma
,
Leishmania
,
Giardia
,
Theileria
,
Toxoplasma
,
Trichomonas
and
Cryptosporidium
, totalizing 22 species, were submitted t
o OrthoMCL resulting in
26,101 homologs groups. Among them, 21,119 groups are orthologs including 7,679
co
-
orthologs (groups that contain recent paralogs) and 4,982 are inparalogs. Among
the orthologs, 348 are shared by all 22 species, representing the Pro
tozoa core
proteome, with this core we perform
ed
a phylogenomic analysis with the 348
concatenated orthologs, resulting in a global supermatrix of 328,228 positions that
generate a species tree for
the 22 protozoa. When we inferred
Core Proteome, the
Kinet
oplastida core has 5,000 orthologous groups and 67.92% (3,396/5000) are
Kinetoplastida Specific, besides 46.29% (1,592/3,396) of these orthologs are
annotated as “hypothetical”. Apicomplexa Core Proteome has 986 orthologous
groups and 27.82% (224/986) are
Apicomplexa Specific whereas 40.63% (92/224)
were classified as hypothetical proteins. Entamoeba Core Proteome has 5,915
orthologous groups and 75.08% (4,441/5,915) of these groups are Entamoeba
Specific and 65.41% (2,905/4441) were annotated as hypothetic
al. Analyzing the
paralogs,
Trichomonas vaginalis
was the
specie
s
that presented the highest number
of inparalogs groups, 2,933
and also
showed 948 co
-
orthologs totalizing 3881
paralogs.
A deep look into the Kinetoplastida order showed that
Trypanosoma cruzi
has
the highest duplication number, totalizing 5777 paralogs, 4963 co
-
orthologs and
814 inparalogs groups
. The
L. amazonensis
analysis resulted in 29,670,588 bases
assembled, and 8802 CDS identified. Comparative analysis into
the
Leishman
ia
genus showed that these 6 species share 7016 ortologs, whilst
L. amazonensis
and
L. mexicana
has the biggest number of specific orthologs and
L. braziliensis
biggest
number of inparalogs. Phylogenomic analysis showed the expected
L. amazonensis
taxonomi
c position together with
L. mexicana
forming the “Mexicana complex” and
the New and Old
Leishmania
(L
.
). spp. separation. Potential analagous proteins were
found between
L. amazonensis
and
H
omo
sapiens
, and also into the
L. amazonensis
proteome. Finally, R
NAi analysis showed that
L. amazonensis
, probably,
do
not have
functional RNAi pathway
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