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RECOVERY OF NOROVIRUS FROM LETTUCE (LACTUCA SATIVA) USING AN ADSORPTION — ELUTION METHOD WITH A NEGATIVELY CHARGED MEMBRANE: COMPARISON OF TWO ELUTION BUFFERS
Filtração
Alface
Bacteriófago PP7
Controle Interno de Processo
Titulo alternativo
Recuperação de Norovirus a partir de alface (Lactuca sativa) utilizando um método de adsorção-eluição com membrana negativamente carregada — comparação de dois tampões de eluiçãoAutor
Afiliación
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde (INCQS). Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Instituto Nacional de Metrologia, Qualidade e Tecnologia (Inmetro). Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Estado do Rio de Janeiro (Unirio). Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Instituto Nacional de Metrologia, Qualidade e Tecnologia (Inmetro). Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal do Estado do Rio de Janeiro (Unirio). Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Resumen en portugues
Salina tamponada fosfatada (STF) e tampão glicina (TG) foram avaliados como eluentes
em um método de adsorção-eluição, utilizando membrana carregada negativamente
associada com reação quantitativa de polimerase em cadeia (qPCR) e semi-nested PCR,
para detecção de Norovírus do genogrupo II (NoV GII) a partir de alface. Nesta metodologia,
o bacteriófago PP7 foi utilizado como controle do processo. A qPCR apresentou
maior sensibilidade do que o semi-nested PCR na detecção de NoV GII. A eficiência de
recuperação, utilizando STF e TG, variou de 24,72 a 60,78% e de 19,48 a 137,26% para
NoV GII e de 0,01 a 0,15% e de 0,13 a 6,04% para o bacteriófago PP7, respectivamente.
A eluição com TG foi mais eficiente na recuperação do bacteriófago PP7 (p = 0,03) embora
nenhuma diferença tenha sido observada para NoV GII (p = 0,57). O TG apresentou
melhor desempenho que a STF como solução para eluição e pode ser considerada uma
melhoria do método.
Resumen en ingles
Phosphate saline buffer (PBS) and glycine buffer (GB) were evaluated as elution buffers
in an adsorption-elution method using a negatively charged membrane associated
with quantitative polymerase chain reaction (qPCR) and semi-nested PCR for detection
of Norovirus genogroup II (NoV GII) from lettuce. In this methodology, PP7 bacteriophage
was used as a virus sample for process control. The qPCR showed more sensitivity
than semi-nested PCR for NoV GII detection. The recovery efficiency, using PBS and GB,
ranged from 24.72 to 60.78% and 19.48 to 137.26% for NoV GII, and from 0.01 to 0.15%
and 0.13 to 6.04% for PP7 bacteriophage, respectively. Elution with GB was more efficient
for PP7 bacteriophage recovery (p = 0.03), but no difference was seen for NoV GII
(p = 0.57). The GB performed better than PBS as an eluent solution and can be considered
a methodological improvement.
Palabras clave en portugues
NorovírusFiltração
Alface
Bacteriófago PP7
Controle Interno de Processo
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