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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/8387
LEISHMANIA (VIANNIA) BRAZILIENSIS TRANSFECTANTS OVEREXPRESSING THE MINIEXON GENE LOSE VIRULENCE IN VIVO.
Author
Affilliation
Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto. Departamento de Biologia Celular e Molecular e Bioagentes Patogênicos. Ribeirão Preto, SP, Brasil
Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto. Departamento de Biologia Celular e Molecular e Bioagentes Patogênicos. Ribeirão Preto, SP, Brasil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil
Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto. Departamento de Biologia Celular e Molecular e Bioagentes Patogênicos. Ribeirão Preto, SP, Brasil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / Instituto de Investigação em Imunologia. Salvador, BA, Brasil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / Instituto de Investigação em Imunologia. Salvador, BA, Brasil
Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto. Departamento de Biologia Celular e Molecular e Bioagentes Patogênicos. Ribeirão Preto, SP, Brasil
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Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil
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Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / Instituto de Investigação em Imunologia. Salvador, BA, Brasil
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil
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Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto. Departamento de Biologia Celular e Molecular e Bioagentes Patogênicos. Ribeirão Preto, SP, Brasil
Abstract
The miniexon gene has a central role in the processing of polycistronic pre-mRNA of kinetoplastids. It is
added to the 5′ extremity of each mRNA, supplying the 5′-capped structure to the molecule. Previous studies
in Leishmania (Leishmania) major showed that the overexpression of the miniexon array attenuates the
virulence of the parasite in in vivo assays. The results presented here extend those findings to Viannia
subgenus. Leishmania (Viannia) braziliensis was transfected with a cosmid harboring a tandem array of one
hundred miniexon gene copies and then characterized by Northern blot analysis. The overexpression of the
exogenous gene was confirmed and its effect on the virulence of L. (V.) braziliensis was investigated in
hamsters. In BALB/c mice we could not detect parasites during the course of 15 weeks of infection. In
addition, hamsters infected with transfectants overexpressing the miniexon gene exhibited only a minor
footpad swelling of late onset and failed to develop progressive lesion, these attenuated parasites could be
recovered from the inoculation site 1 year after infection. The persistence of parasites in the host indicates
that a stable line overexpressing the miniexon may be tested as live vaccine against leishmaniasis.
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