Advisor | Alves, Carlos Roberto | |
Author | Côrtes, Luzia Monteiro de Castro | |
Access date | 2013-10-29T12:32:47Z | |
Available date | 2013-10-29T12:32:47Z | |
Document date | 2012 | |
URI | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/7212 | |
Abstract in Portuguese | A Leishmania (Viannia) braziliensis é um parasito de grande importância na área de Saúde Pública, sendo a espécie responsável pelo maior número de casos de leishmaniose cutânea na América do Sul. Por ser uma doença transmitida por vetores, o sucesso do ciclo biológico do parasito está diretamente relacionado com sua adesão no vetor, especificamente no intestino do mesmo. Desta forma, o foco deste projeto é demonstrar que interações do tipo proteínas ligante-receptores podem participar da fixação dos promastigotas às células do hospedeiro invertebrado. Devido à falta de informação sobre proteínas ligantes de heparina (PLHs) neste parasito, apresentamos novos dados sobre a distribuição subcelular, atividade proteolítica e capacidade de ligação destas proteínas. Os dados aqui apresentados confirmam que as frações subcelulares (flagelo e membrana) dos promastigotas são ricas em PLHs (representadas por duas bandas de proteína em gel de poliacrilamida 65 kDa e 55 kDa) e que estas proteínas, seja em solução ou nativas na superficie do parasito, podem formar complexos estáveis com heparina. Dentre as duas bandas de proteínas estudadas, apenas a banda de 65 kDa mostrou características de metalo-proteinase. Na continuidade deste estudo, verificamos a participação das PLHs na dinâmica de interação in vitro entre o parasito e a linhagem de células de Lutzomyia longipalpis (Lulo). Verificamos que espécies dos subgêneros Leishmania e Viannia têm grande potencial para aderir às células Lulo e que a adesão ocorre tanto pelo corpo como pelo flagelo destes parasitos. Através de ensaios de competição constatamos que esta adesão pode ser mediada pela interação entre as PLHs e o sulfato de heparam. Ainda neste trabalho descrevemos, pela primeira vez, que as células Lulo apresentam glicosaminoglicanos como, sulfato de heparam e sulfato de condroitim. O conjunto de dados apresentados nesta tese contribui para o entendimento das interações moleculares que possivelmente ocorrem durante a adesão do parasito L. (V.) braziliensis ao inseto vetor, aqui representado pelas células Lulo. | pt_BR |
Language | por | pt_BR |
Rights | restricted access | pt_BR |
Subject in Portuguese | Leishmania spp | pt_BR |
Subject in Portuguese | Leishmania (V.) braziliensis | pt_BR |
Subject in Portuguese | Células Lulo | pt_BR |
Subject in Portuguese | Heparina | pt_BR |
Subject in Portuguese | Sulfato de Heparam | pt_BR |
Subject in Portuguese | Ressonância Plasmônica de superfície | pt_BR |
Title | Linhagem de células de Lutzomyia longipalpis (Lulo): estudos de adesão com as Leishmania spp e com a participação das proteínas ligantes de heparina de Leishmania (Viannia) braziliensis. | pt_BR |
Alternative title | Cell Line from Lutzomyia longipalpis (Lulo): adhesion studies with Leishmania spp and with participation of heparin binding proteins of Leishmania (Viannia) braziliensis. | pt_BR |
Type | Thesis | pt_BR |
Defense date | 2012-03-27 | |
Departament | Vice Direção de Ensino, Informação e Comunicação | pt_BR |
Defense Institution | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil | pt_BR |
Place of Defense | Rio de Janeiro, RJ. | pt_BR |
Program | Pós-Graduação em Biologia Parasitária | pt_BR |
Co-Advisor | Brazil, Reginaldo Peçanha | |
Abstract | Leishmania (V.) braziliensis is a parasite of great importance in Public Health and is responsible for most of cutaneous leishmaniasis cases in South America. As a vector-borne disease, the success of the parasite's biological cycle is directly related to its adhesion to the gut of the vector. Thus, the focus of this project is to demonstrate that ligand-receptor type interactions may participate in the adhesion of promastigote cells to the invertebrate host. Due to the lack of information about heparin binding proteins (HBPs) in this parasite, we present new data on the subcellular distribution, proteolytic activity and binding capacity of these proteins. The present data indicate that promastigotes subcellular fractions (from membrane or flagellum) are rich in HBPs (represented by two protein bands in polyacrilamide gel of 65 kDa and 55 kDa and that these proteins, either in solution or native on the surface of the parasites, can form stable complexes with the heparin. Between the two studied protein bands, only the 65 kDa band showed characteristics of metallo-proteinase. Further in our study, we verified the participation of HBPs in the dynamics of interaction between the parasites and, a cell line from Lutzomyia longipalpis (Lulo cells). We observed that species from both subgenera Leishmania and Viannia have great potential to adhere to the Lulo cells and that this adherence occurs both by the body and the flagellum of these parasites. Through competition assays it was noted that this adhesion may be mediated by the interaction between heparan sulfate and HBPs. Additionally, this study is the first report of the presence of glycosaminoglycans heparan sulfate and chondroitin sulfate on the surface of Lulo cells. The set of data presented in this thesis contributes to the understanding of the molecular interactions that occur during the adhesion of L. (V.) braziliensis parasites to the insect vector, in this study represented by the study model of Lulo cells. | pt_BR |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil | pt_BR |
Subject | Leishmania spp | pt_BR |
Subject | Leishmania (V.) braziliensis | pt_BR |
Subject | Lulo cells | pt_BR |
Subject | Heparin | pt_BR |
Subject | Heparan sulfate | pt_BR |
Subject | surface plasmon resonance | pt_BR |
Member of the board | Leon, Leonor Laura Pinto | |
Member of the board | Gontijo, Célia Maria Ferreira | |
Member of the board | Soares, Maurilio José | |
Member of the board | Calabrese, Katia da Silva | |
Member of the board | Filho, José Dilermando Andrade | |