Author | Horbach, Ingrid Siciliano | |
Author | Azevedo, Adriana de Souza | |
Author | Schwarcz, Waleska Dias | |
Author | Alves, Nathalia Dos Santos | |
Author | Dias, Brenda de Moura | |
Author | Setatino, Bruno Pimenta | |
Author | Moura, Luma da Cruz | |
Author | Souza, Ariane Faria de | |
Author | Denani, Caio Bidueira | |
Author | Silva, Stephanie Almeida da | |
Author | Pimentel, Thiago Goes | |
Author | Ferreira, Victor de Oliveira Silva | |
Author | Azamor, Tamiris | |
Author | Bom, Ana Paula Dinis Ano | |
Author | Gouvea, Maria da Penha Gomes | |
Author | Mill, José Geraldo | |
Author | Valim, Valéria | |
Author | Polese, Jessica | |
Author | Campi-Azevedo, Ana Carolina | |
Author | Pascoal, Vanessa Peruhype Magalhães | |
Author | Carvalho, Andréa Teixeira de | |
Author | Martins Filho, Olindo Assis | |
Author | Lima, Sheila Maria Barbosa de | |
Author | Sousa Junior, Ivanildo Pedro de | |
Access date | 2024-02-20T16:20:32Z | |
Available date | 2024-02-20T16:20:32Z | |
Document date | 2024 | |
Citation | HORBACH, Ingrid Siciliano et al. Plaque Reduction Neutralization Test (PRNT) Accuracy in Evaluating Humoral Immune Response to SARS-CoV-2. Diseases, v. 12, n. 1, 29, 2024. https://dx.doi.org/10.3390/diseases12010029. | en_US |
ISSN | 2079-9721 | en_US |
URI | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/62682 | |
Language | eng | en_US |
Publisher | MDPI AG | en_US |
Rights | open access | en_US |
Title | Plaque Reduction Neutralization Test (PRNT) Accuracy in Evaluating Humoral Immune Response to SARS-CoV-2 | en_US |
Type | Article | en_US |
Abstract | Massive vaccination positively impacted the SARS-CoV-2 pandemic, being a strategy to increase the titers of neutralizing antibodies (NAbs) in the population. Assessing NAb levels and understanding the kinetics of NAb responses is critical for evaluating immune protection. In this study, we optimized and validated a PRNT50 assay to assess 50% virus neutralization and evaluated its accuracy to measure NAbs to the original strain or variant of SARS-CoV-2. The optimal settings were selected, such as the cell (2 × 105 cells/well) and CMC (1.5%) concentrations and the viral input (~60 PFU/well) for PRNT-SARS-CoV-2 with cut-off point = 1.64 log5 based on the ROC curve (AUC = 0.999). The validated PRNT-SARS-CoV-2 assay presented high accuracy with an intraassay precision of 100% for testing samples with different NAb levels (low, medium, and high titers). The method displays high selectivity without cross-reactivity with dengue (DENV), measles (MV), zika (ZIKV), and yellow fever (YFV) viruses. In addition, the standardized PRNT-SARS-CoV-2 assay presented robustness when submitted to controlled variations. The validated PRNT assay was employed to test over 1000 specimens from subjects with positive or negative diagnoses for SARS-CoV-2 infection. Patients with severe COVID-19 exhibited higher levels of NAbs than those presenting mild symptoms for both the Wuhan strain and Omicron. In conclusion, this study provides a detailed description of an optimized and validated PRNT50 assay to monitor immune protection and to subsidize surveillance policies applied to epidemiologic studies of COVID-19. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos Bio-Manguinhos. Laboratório de Análise Imunomolecular. Rio de Janeiro, RJ, Brazil/Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Programa de Pós-Graduação em Medicina Tropical. Rio de Janeiro, RJ, Brazil. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos Bio-Manguinhos. Laboratório de Análise Imunomolecular. Rio de Janeiro, RJ, Brazil | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos Bio-Manguinhos. Laboratório de Análise Imunomolecular. Rio de Janeiro, RJ, Brazil | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos Bio-Manguinhos. Laboratório de Análise Imunomolecular. Rio de Janeiro, RJ, Brazil | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos Bio-Manguinhos. Laboratório de Análise Imunomolecular. Rio de Janeiro, RJ, Brazil | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos Bio-Manguinhos. Laboratório de Análise Imunomolecular. Rio de Janeiro, RJ, Brazil | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos Bio-Manguinhos. Laboratório de Análise Imunomolecular. Rio de Janeiro, RJ, Brazil | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos Bio-Manguinhos. Laboratório de Análise Imunomolecular. Rio de Janeiro, RJ, Brazil | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos Bio-Manguinhos. Laboratório de Análise Imunomolecular. Rio de Janeiro, RJ, Brazil/Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Programa de Pós-Graduação em Medicina Tropical. Rio de Janeiro, RJ, Brazil. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos Bio-Manguinhos. Laboratório de Tecnologia Virológica. Rio de Janeiro, RJ, Brazil. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos Bio-Manguinhos. Núcleo de Apoio Administrativo VDINV. Rio de Janeiro, RJ, Brazil. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos Bio-Manguinhos. Seção de Validação Analítica. Rio de Janeiro, RJ, Brazil. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos Bio-Manguinhos. Laboratório de Tecnologia Imunológica. Rio de Janeiro, RJ, Brazil. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos Bio-Manguinhos. Laboratório de Tecnologia Imunológica. Rio de Janeiro, RJ, Brazil. | en_US |
Affilliation | Universidade Federal do Espírito Santo. Hospital Universitário Cassiano Antônio Moraes. Vitória, ES, Brazil. | en_US |
Affilliation | Universidade Federal do Espírito Santo. Hospital Universitário Cassiano Antônio Moraes. Vitória, ES, Brazil. | en_US |
Affilliation | Universidade Federal do Espírito Santo. Hospital Universitário Cassiano Antônio Moraes. Vitória, ES, Brazil. | en_US |
Affilliation | Universidade Federal do Espírito Santo. Programa de Pós-Graduação em Ciências Fisiológicas. Vitória, ES, Brazil. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto René Rachou. Grupo Integrado de Pesquisa em Biomarcadores. Belo Horizonte, MG, Brazil. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto René Rachou. Grupo Integrado de Pesquisa em Biomarcadores. Belo Horizonte, MG, Brazil. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto René Rachou. Grupo Integrado de Pesquisa em Biomarcadores. Belo Horizonte, MG, Brazil. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto René Rachou. Grupo Integrado de Pesquisa em Biomarcadores. Belo Horizonte, MG, Brazil. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos Bio-Manguinhos. Departamento de Desenvolvimento Experimental e Pré-clínico. Rio de Janeiro, RJ, Brazil. | en_US |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Virologia e Parasitologia Molecular. Rio de Janeiro, RJ, Brazil. | en_US |
Subject | COVID-19 | en_US |
Subject | Omicron | en_US |
Subject | PRNT | en_US |
Subject | SARS-CoV-2 | en_US |
Subject | Wuhan | en_US |
Subject | neutralizing antibodies | en_US |
Subject | vaccination | en_US |
Subject | validation | en_US |