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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/40228
DETECÇÃO DE CÉLULAS PRODUTORAS DE ANTICORPOS ESPECÍFICOS PARA LEISHMANIA INFANTUM EM TECIDO ESPLÊNICO
Fontes, Jonathan Luís Magalhães | Date Issued:
2019
Comittee Member
Affilliation
Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina. Salvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil.
Abstract in Portuguese
INTRODUÇÃO: A leishmaniose visceral zoonótica (LV) é uma
enfermidade causada pela Leishmania infantum, acomete seres humanos
e também animais. O baço está envolvido na imunopatogênese da LV e
apresenta alterações nos microambientes da polpa branca que estão
associadas ao aumento da susceptibilidade à coinfecções e a morte. A
plasmocitose é uma das alterações observadas no baço na LV, porém a
fração dessas células produtora de anticorpos específicos para moléculas
de Leishmania e a distribuição dessas células nos compartimentos
esplênicos ainda não é conhecida. OBJETIVO: O objetivo deste trabalho
foi padronizar a técnica para detecção de células produtoras de anticorpos
contra antígenos de L. infantum e determinar a proporção e distribuição
dessas células no baço de cães com LV. MATERIAL E MÉTODOS:
Antígenos solúveis biotinilados de membrana de promastigotas de L.
infantum foram utilizados como sondas em uma reação de
imunohistoquímica modificada para detectar a presença de células
secretoras de anticorpos anti-L. infantum. Utilizamos baços de 8 cães
oriundos de área endêmica para LV e como controle, 3 cães normais do
canil do Instituto Gonçalo Moniz. As amostras foram criopreservadas,
seccionadas e coletadas em lâminas para imunohistoquímica. A
quantidade de células marcadas e não marcadas foi quantificada, e
calculada a proporção na polpa vermelha (PV) e Bainha linfoide
periarteriolar (PALS) do baço. RESULTADOS: Cães com LV possuem
hiperglobulinemia e mais plasmócitos na PV que cães sem LV. Dos cães
com LV, 75% (6/8) apresentavam menos de 42% de células secretoras de
anticorpos anti-L. infantum na PV. Ainda, a proporção de plasmócitos
marcados é maior na PALS (59,3%) do que na PV (29,8%) e quanto maior
a proporção na PALS, menor é a proporção de células positivas na PV.
CONCLUSÕES: A maioria dos plasmócitos observados na PV durante a LV
não é específico para L.infantum. E os animais que tem perfil clínico mais
grave tendem a apresentar menor frequência de plasmócitos específicos
na PV.
Abstract
INTRODUCTION: Visceral leishmaniasis (VL) is a disease caused by parasites of the genus Leishmania, affecting humans and other mammals worldwide. Spleen is involved in VL immunopathogenesis and presents alterations in white pulp microenvironments that are associated with increased susceptibility to coinfections and patient death. Plasmacytosis in splenic red pulp (RP) is one of the main alterations observed, but the specificity of secreted antibodies and distribution of these cells had not yet been evaluated. AIM: The aim of this study was to standardize the technique for detection of anti-L. infantum antibody producing cells and to determine the proportion of these cells in the spleen of dogs with VL. MATERIAL AND METHODS: L. infantum soluble biotinylated antigens were used as probes in a modified immunohistochemistry reaction to detect the presence of anti-L. infantum antibody secreting cells. Were used spleens from eight dogs from the endemic area for VL and as a control, three dogs from Instituto Gonçalo Moniz kennel. The samples were cryopreserved and sectioned on slides for immunohistochemistry. The amount of labeled and unlabeled cells was quantified, and the ratio in spleen RP and Periarteriolar lymphatic sheath (PALS) was calculated. RESULTS: Dogs with VL present hyperglobulinemia and more plasma cells in RP than dogs without VL. Among dogs with VL, 75% (6/8) had less than 42% of anti-L. infantum antibodysecreting cells in RP. The proportion of labeled plasma cells is higher in PALS (59.3%) than in RP (29.8%) and as higher the proportion in PALS, smaller is the proportion of positive cells in RP. CONCLUSIONS: Most plasma cells observed in RP during VL are not specific for L. infantum. Also, animals that have severe clinical profile tend to have a lower frequency of specific plasma cells in PV.
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