Please use this identifier to cite or link to this item:
https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/37912
Type
ArticleCopyright
Open access
Collections
- IOC - Artigos de Periódicos [12488]
Metadata
Show full item record
TRYPSIN-LIKE ACTIVITY OF MEMBRANE-BOUND MIDGUT PROTEASES FROM ANTICARSIA GEMMATALIS (LEPIDOPTERA: NOCTUIDAE)
Author
Affilliation
Universidade Federal de Viçosa. Instituto de Biotecnologia Aplicada à Agricultura e Ciência Animal. Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular. Viçosa, MG, Brasil.
Universidade Federal de Viçosa. Instituto de Biotecnologia Aplicada à Agricultura e Ciência Animal. Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular. Viçosa, MG, Brasil / Universidade Federal de Viçosa. Departamento de Biologia Animal. Viçosa, MG, Brasil.
Universidade Federal de Viçosa. Departamento de Biologia Animal. Viçosa, MG, Brasil.
Universidade Federal de Viçosa. Departamento de Microbiologia. Instituto de Biotecnologia Aplicada à Agricultura e Ciência Animal. Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular. Viçosa, MG, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Universidade Federal de Viçosa. Instituto de Biotecnologia Aplicada à Agricultura e Ciência Animal. Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular. Viçosa, MG, Brasil / Universidade Federal de Viçosa. Departamento de Biologia Animal. Viçosa, MG, Brasil.
Universidade Federal de Viçosa. Departamento de Biologia Animal. Viçosa, MG, Brasil.
Universidade Federal de Viçosa. Departamento de Microbiologia. Instituto de Biotecnologia Aplicada à Agricultura e Ciência Animal. Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular. Viçosa, MG, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Abstract
Membrane-bound proteases from preparations of the midgut of 5th instar velvetbean caterpillars, Anticarsia gemmatalis
(Hübner) were obtained by resuspension of the pellet obtained after 100,000 g centrifugation. As expected of trypsin-like proteases,
they hydrolyzed casein and the synthetic substrates N--benzoyl-L-Arg-p-nitroanilidine (L-BApNA) and N--p-tosyl-L-Arg methyl
ester (L-TAME). Higher activities were observed at 50°C, and at pH 8.5 and 8.0 for both synthetic substrates L-BApNA and
L-TAME. The membrane-bound proteases were inhibited by EDTA, phenylmethan sulphonyl fluoride (PMSF), tosyl-L-lysine chloromethyl
ketone (TLCK), benzamidine and aprotinin. TLCK and benzamidine were particularly active inhibitors. The KM-values
obtained were 0.23 mM for L-BApNA and 92.5 μM for L-TAME. These results provide evidence for the presence of membranebound
trypsin-like proteases in the midgut of the velvetbean caterpillar, a key soybean pest in warm climates. The interaction
between A. gemmatalis digestive proteases and soybean protease inhibitors has potentially important consequences for soybean
breeding programs.
Share