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2030-01-01
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- IOC - Artigos de Periódicos [12488]
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REAL-TIME PCR VERSUS CONVENTIONAL PCR FOR MALARIA PARASITE DETECTION IN LOW-GRADE PARASITEMIA
Author
Affilliation
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Imunologia. Laboratório de Pesquisa em Malária. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Imunologia. Laboratório de Pesquisa em Malária. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Imunologia. Laboratório de Pesquisa em Malária. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular. Laboratório de Biologia Molecular e Doenças Endêmicas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Imunologia. Laboratório de Pesquisa em Malária. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Fundação de Hematologia e Hemoterapia do Estado do Amazonas. Manaus, AM, Brasil.
undação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular. Laboratório de Bioquímica Molecular e Diagnose de Doenças Infecciosas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Instituto Evandro Chagas. Secretaria de Vigilância em Saúde. Ambulatório e Laboratório de Ensaios Clínicos de Malaria. Belém, PA,Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Imunologia. Laboratório de Pesquisa em Malária. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Imunologia. Laboratório de Pesquisa em Malária. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Imunologia. Laboratório de Pesquisa em Malária. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Imunologia. Laboratório de Pesquisa em Malária. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular. Laboratório de Biologia Molecular e Doenças Endêmicas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Imunologia. Laboratório de Pesquisa em Malária. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Fundação de Hematologia e Hemoterapia do Estado do Amazonas. Manaus, AM, Brasil.
undação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular. Laboratório de Bioquímica Molecular e Diagnose de Doenças Infecciosas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Instituto Evandro Chagas. Secretaria de Vigilância em Saúde. Ambulatório e Laboratório de Ensaios Clínicos de Malaria. Belém, PA,Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Imunologia. Laboratório de Pesquisa em Malária. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Departamento de Imunologia. Laboratório de Pesquisa em Malária. Rio de Janeiro, RJ. Brasil.
Abstract
We have optimized a faster and cheaper real-time PCR and developed a conventional genus specific PCR based on 18S rRNA gene to detect malaria parasites in low-grade parasitemias. Additionally, we compared these PCRs to the OptiMAL-IT test. Since there is no consensus on choice of standard quantitative curve in real-time assays, we decided to investigate the performance of parasite DNA from three different sources: "genome", amplicon and plasmid. The amplicon curve showed the best efficiency in quantifying parasites. Both PCR assays detected 100% of the clinical samples tested; the sensitivity threshold was 0.5 parasite/mul and no PCR positive reaction occurred when malaria parasites were not present. Conversely, if OptiMAL-IT were employed for malaria diagnosis, 30% of false-negative results could be expected. We conclude that PCR assays have potential for detecting malaria parasites in asymptomatic infections, in evaluation of malaria vaccine molecule candidates, for screening blood donors, especially in endemic areas, or even in monitoring malaria therapy.
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