Recrutamento de neutrófilos induzido por leptina em modelo murino de obesidade induzida por dieta

Abstract

Leptina é um hormônio/citocina produzido pelo tecido adiposo que inibe a ingestão alimentar e o metabolismo lipídico. É altamente expressa na obesidade, sem no entanto intensificar seu efeito de inibição do apetite. Dentre outras funções, regula a imunidade inata e adaptativa. Sabe-se que a leptina ativa macrófagos, induzindo a produção de mediadores inflamatórios, como TNF-\F061, IL-1, IL-6 e LTB4. A leptina parece ainda regular a participação de neutrófilos em respostas inflamatórias. No entanto, não estão esclarecidos os mecanismos pelos quais a leptina seria capaz de regular migração ou ativação de neutrófilos, uma vez que estes não apresentam o principal receptor funcional de leptina, ObRb. Estudos in vitro não são conclusivos quanto aos efeitos serem diretos ou indiretos, enquanto estudos in vivo não se detém a estudar efeitos quimiotáticos de leptina sobre neutrófilos. O objetivo deste trabalho é investigar a sinalização por leptina envolvida na migração de neutrófilos. Para isso, foi realizada estimulação de animais C57Bl/6, bem como knockout de TNFR1-/-, MIP-1\F061-/-, 5-LO -/-, PI3K\F067-/-, machos, com leptina i.p. por 1, 6 e 24 h para avaliação do influxo de neutrófilos para a cavidade peritoneal e quantificação de mediadores inflamatórios no sobrenadante de lavado peritoneal e plasma. Também foram realizados tratamentos com rapamicina, para inibição de mTOR, Zileuton e U-75302, para inibir a sinalização por LTB4, bem como anticorpos anti-KC Foi observado que macrófagos incubados com leptina 20 nM in vitro produzem KC e TNF-\F061, mediadores que recrutam neutrófilos. In vivo, foi observado que a migração de neutrófilos por leptina é dependente de TNF-\F061, KC e PI3K\F067, e independente de 5-LO/LTB4, MIP-1\F061\F020e mTOR. Para avaliar o efeito de hiperleptinemia crônica na imunidade inata, foi estabelecido um modelo murino de obesidade induzida por dieta. Animais do grupo obeso foram alimentados com dieta hiperlipídica com 60% de teor calórico proveniente de gordura, enquanto a dieta controle possui 10% de teor calórico proveniente de gordura. Animais obesos apresentaram hiperglicemia e hiperleptinemia. A dieta hiperlipídica predispôs a ativação de macrófagos peritoneais por leptina, incrementando a produção de corpúsculos lipídicos. Os níveis de TNF-\F061 no sobrenadante de lavado peritoneal foram maiores em animais obesos não estimulados com leptina i.p., sendo a estimulação com leptina i.p. capaz de induzir recrutamento de neutrófilos em animais obesos. Tais eventos sugerem que a dieta hiperlipídica induziu background inflamatório, que, no entanto, não interferiu na capacidade da leptina induzir recrutamento neutrofílico. Tais dados sugerem que leptina promove recrutamento de neutrófilos por meio da ativação de macrófagos e produção de mediadores. Além disso, a obesidade experimental promove ativação subclínica de macrófagos, sem alterar o recrutamento de neutrófilos. Com este trabalho, espera-se contribuir para o melhor entendimento da participação da leptina na regulação do sistema imune inato