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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/16257
SECRETORY EXPRESSION OF BOVINE HERPESVIRUS TYPE 1/5 GLYCOPROTEIN E IN PICHIA PASTORIS FOR THE DIFFERENTIAL DIAGNOSIS OF VACCINATED OR INFECTED CATTLE
Rinotraqueíte infecciosa bovina
Vulvovaginite pustulosa infecciosa
Balanopostite pustulosa infecciosa
Encefalite herpética bovina
Imunoensaio
Animais
Differential vaccine
Infectious bovine rhinotracheitis
Infectious pustular vulvovaginitis
Infectious pustular balanoposthitis
Bovine herpetic encephalitis
Author
Affilliation
Universidade Federal de Pelotas. Núcleo de Biotecnologia - CDTec. Pelotas, RS, Brasil
Universidade Federal de Pelotas. Núcleo de Biotecnologia - CDTec. Pelotas, RS, Brasil
Universidade Federal de Pelotas. Núcleo de Biotecnologia - CDTec. Pelotas, RS, Brasil
Universidade Federal de Pelotas. Núcleo de Biotecnologia - CDTec. Pelotas, RS, Brasil
Universidade Federal de Pelotas. Núcleo de Biotecnologia - CDTec. Pelotas, RS, Brasil
Universidade Federal de Pelotas. Instituto de Biologia. Departamento de Microbiologia e Parasitologia. Pelotas, RS, Brasil
Universidade Federal de Pelotas. Núcleo de Biotecnologia - CDTec. Pelotas, RS, Brasil
Universidade Federal de Pelotas. Núcleo de Biotecnologia - CDTec. Pelotas, RS, Brasil
Universidade Federal do Rio Grande do Sul. Instituto de Ciências Básicas e da Saúde. Porto Alegre, RS, Brasil
Universidade Federal do Rio Grande do Sul. Instituto de Ciências Básicas e da Saúde. Porto Alegre, RS, Brasil
Universidade Federal de Pelotas. Núcleo de Biotecnologia - CDTec. Pelotas, RS, Brasil
Universidade Federal de Pelotas. Núcleo de Biotecnologia - CDTec. Pelotas, RS, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil
Universidade Federal de Pelotas. Núcleo de Biotecnologia - CDTec. Pelotas, RS, Brasil
Universidade Federal de Pelotas. Núcleo de Biotecnologia - CDTec. Pelotas, RS, Brasil
Universidade Federal de Pelotas. Núcleo de Biotecnologia - CDTec. Pelotas, RS, Brasil
Universidade Federal de Pelotas. Núcleo de Biotecnologia - CDTec. Pelotas, RS, Brasil
Universidade Federal de Pelotas. Instituto de Biologia. Departamento de Microbiologia e Parasitologia. Pelotas, RS, Brasil
Universidade Federal de Pelotas. Núcleo de Biotecnologia - CDTec. Pelotas, RS, Brasil
Universidade Federal de Pelotas. Núcleo de Biotecnologia - CDTec. Pelotas, RS, Brasil
Universidade Federal do Rio Grande do Sul. Instituto de Ciências Básicas e da Saúde. Porto Alegre, RS, Brasil
Universidade Federal do Rio Grande do Sul. Instituto de Ciências Básicas e da Saúde. Porto Alegre, RS, Brasil
Universidade Federal de Pelotas. Núcleo de Biotecnologia - CDTec. Pelotas, RS, Brasil
Universidade Federal de Pelotas. Núcleo de Biotecnologia - CDTec. Pelotas, RS, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil
Abstract
Bovine herpesvirus (BoHV) glycoprotein E (gE) is a non-essential envelope glycoprotein and the deletion of gE has been used to develop BoHV-1 and BoHV-5 differential vaccine strains. The DIVA (Differentiation of Infected from Vaccinated Animals) strategy, using marker vaccines based on gE-negative BoHV strains, allows the identification of vaccinated or infected animals in immunoassays designed to detect anti-gE antibodies. In this study a codon optimized synthetic sequence of gE containing highly conserved regions from BoHV-1 and BoHV-5 was expressed in Pichia pastoris. Following expression, the recombinant gE (rgE) was secreted and purified from the culture medium. The rgE was identified by Western blotting (WB) using sera from cattle naturally infected with BoHV-1 and/or BoHV-5, or sera from bovines experimentally infected with wild-type BoHV-5. Sera collected from cattle vaccinated with a BoHV-5 gI/gE/US9¯ marker vaccine failed to recognise rgE. Expression of rgE, based on a sequence containing highly conserved regions from BoHV-1 and BoHV-5, in P. pastoris enabled the production of large quantities of rgE suitable for use in immunoassays for the differentiation vaccinated or infected cattle.
Keywords in Portuguese
VacinaRinotraqueíte infecciosa bovina
Vulvovaginite pustulosa infecciosa
Balanopostite pustulosa infecciosa
Encefalite herpética bovina
Imunoensaio
Animais
Keywords
ImmunoassayDifferential vaccine
Infectious bovine rhinotracheitis
Infectious pustular vulvovaginitis
Infectious pustular balanoposthitis
Bovine herpetic encephalitis
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