Advisor | Oliveira, Sheilla Andrade de | pt_BR |
Author | Guarines, Klarissa Miranda | pt_BR |
Access date | 2016-05-19T13:08:22Z | |
Available date | 2016-05-19T13:08:22Z | |
Document date | 2015 | |
Citation | GUARINES, Klarissa Miranda. Avaliação de duas técnicas de reação em cadeia da polimerase na detecção do Mycobacterium tuberculosis em diferentes amostras biológicas. 2015. 95 f. Dissertação (Mestrado em Biociências e Biotecnologia em Saúde) - Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães, Recife, 2015. | pt_BR |
URI | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/14352 | |
Abstract in Portuguese | A tuberculose (TB) é uma doença infecto-contagiosa causada pelo bacilo Mycobacterium tuberculosis e que permanece como um importante problema de saúde pública mundial, sendo a TB pulmonar a forma mais comum de apresentação da doença. O diagnóstico precoce e tratamento adequado são essenciais para a eficácia dos programas públicos de controle da TB. Novos metodologias mais rápidas, sensíveis e específicas, como a reação em cadeia da polimerase (PCR), vem sendo propostas no diagnóstico da doença. O objetivo desse estudo foi avaliar o desempenho de duas PCR, a PCR em tempo real (qPCR) e a Nested PCR em único tubo (STNPCR), em diferentes amostras biológicas, no diagnóstico da tuberculose pulmonar, além de compará-las com as metodologias convencionais (baciloscopia e cultura) e entre si. Para isso foram analisados 125 pacientes que tiveram amostras de sangue (125 amostras de plasma e 116 amostras de PBMC), urina (n=125) e escarro (n=125) coletadas, totalizando a análise de 491 amostras biológicas. Amostras de escarro e urina foram descontaminadas pelo método de Petroff NAOH 4 por cento modificado e semeadas em meio de cultura Lõwenstein-Jensen (LJ), enquanto as amostras de sangue eram separadas em plasma e PBMC. Após processamento, deu-se a extração de DNA através do kit comercial da Qiagen seguida de amplificação pelas duas metodologias de PCR. Para análise estatística calculou-se a sensibilidade, especificidade, valores preditivos positivo e negativo e índice kappa das técnicas. A STNPCR apresentou, em amostras de sangue, sensibilidade de 26,3 por cento e especificidade de 97,7 por cento. Em amostras de urina observou-se uma S = 7,9 por cento e E = 98,9 por cento e em escarro S = 21,1 por cento e E = 98,9 por cento. Quando analisadas as asmotras em paralelo, a sensibilidade da STNPCR foi igual a 44,7 por cento enquanto sua especificidade foi 97,7 por cento. Já a qPCR, em amostras de sangue, obteve sensibilidade igual a 26,3 por cento e especificidade de 95,4 por cento. Em amostras de urina a sensibilidade obtida foi 47,4 por cento e a especificidade 79,3 por cento e, em escarro, S = 36,8 por cento e E = 95,4 por cento. Quando analisada em paralelo, a sensibilidade da qPCR foi 65,8 por cento e a especificidade foi 79,3 por cento. A baciloscopia de escarro apresentou sensibilidade de 41,7 por cento e especificidade de 100 por cento, enquanto as culturas em urina e escarro apresentaram sensibilidade e especificidade, respectivamente, de 10,5 por cento e 100 por cento e 60,5 por cento e 96,6 por cento. Pode-se concluir que a qPCR apresentou melhor desempenho quando comparada à STNPCR e também bom desempenho quando comparada às metodologias convencionais, e que quando analisa-se mais de um tipo de amostras biológica, a eficácia das técnicas é aumentada. Espera-se que com a utilização dessa técnica molecular, seja possível a melhor elucidação dos casos de TB pulmonar, promovendo maior taxa de tratamento dos pacientes e menor risco de transmissão da doença | pt_BR |
Language | por | pt_BR |
Publisher | Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães | pt_BR |
Rights | open access | pt_BR |
Subject in Portuguese | Tuberculose pulmonar
PCR
Diagnóstico | pt_BR |
Title | Avaliação de duas técnicas de reação em cadeia da polimerase na detecção do Mycobacterium tuberculosis em diferentes amostras biológicas | pt_BR |
Alternative title | Evaluation of two polymerase chain reaction assays in the detection of Mycobacterium tuberculosis in different biological samples | pt_BR |
Type | Dissertation | pt_BR |
Defense date | 2015-03-06 | pt_BR |
Defense Institution | Fundação Oswaldo Cruz.Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. | pt_BR |
Degree level | Mestrado Acadêmico | pt_BR |
Place of Defense | Recife/PE | pt_BR |
Program | Programa de Pós‐Graduação em Biociências e
Biotecnologia em Saúde | pt_BR |
Co-Advisor | Schindler, Haiana Charifker | pt_BR |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil | pt_BR |
Member of the board | Sheilla Andrade de Oliveira | pt_BR |
Member of the board | Montenegro, Sílvia Maria Lucena | pt_BR |
Member of the board | Montenegro, Lílian Maria Lapa | pt_BR |
DeCS | Tuberculose pulmonar | pt_BR |
DeCS | Reação em Cadeia da Polimerase | pt_BR |
DeCS | Mycobacterium tuberculosis/isolamento & Purificaçäo | pt_BR |
DeCS | Escarro/microbiologia | pt_BR |
DeCS | Sensibilidade e Especificidade | pt_BR |
DeCS | Valor Preditivo dos Testes | pt_BR |