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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/14341
IDENTIFICAÇÃO DE MOTIVOS RELEVANTES PARA A FUNÇÃO DO FATOR DE INICIAÇÃO DA TRADUÇÃO EIF4E3 DE LEISHMANIA SP
Leishmania mexicana/metabolismo
Leishmania infantum/genética
Leishmania infantum/metabolismo
Fator de Iniciação 4F em Eucariotos
Expressão Gênica
Ligação Proteica
Biossíntese de Proteínas
Homologia de Sequência do Ácido Nucleico
Proteínas de Protozoários
Proteínas de Ligação a Poli(A)
Moraes, Rômulo Murilo do Nascimento | Date Issued:
2015
Alternative title
Identification of relevant motifs to translation initiation factor EIF4E3 function in Leishmania spAdvisor
Comittee Member
Affilliation
Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil
Abstract in Portuguese
Os tripanossomatídeos são organismos caracterizados pelo controle póstranscricional da expressão gênica, principalmente em nível de tradução. Na tradução em eucariotos, tem grande destaque o complexo eIF4F, sendo um de seus principais componentes o fator de iniciação da tradução eIF4E. Já foram descritos em tripanossomatídeos seis homólogos para o eIF4E, nomeados EIF4E1 a 6. Em
um estudo com Leishmania amazonensis, focado no EIF4E3, percebeu-se que seu
perfil de expressão se alterava rapidamente numa curva de crescimento, com este apresentando ao menos duas bandas. As mudanças observadas sugeriam
modificações pós-traducionais do tipo fosforilação, algo posteriormente confirmado. Analisando-se a sequência do EIF4E3 de Leishmania, foi possível identificar a presença de possíveis sítios de fosforilação e de ligação a parceiros funcionais como homólogos do eIF4G, outro componente do complexo eIF4F, e da proteína de
ligação á cauda poli-A (PABP). No presente estudo foi analisado o perfil de
expressão e a capacidade de ligação a parceiros funcionais do EIF4E3 de
Leishmania superexpresso em células transfectadas e no qual foram introduzidas
mutações em motivos específicos. Os resultados mostraram um perfil de expressão de ao menos três bandas para o EIF4E3 de L. amazonensis e duas para L. infantum, com o sítio S75, presente apenas na primeira, sendo o responsável por esta
diferença. Em ensaios de imunoprecipitação, foi identificado um motivo que, quando mutado, aboliu a ligação do EIF4E3 com a PABP3, sugerindo este como o sítio de
interação entre os fatores. Com a análise do efeito de mutações no EIF4E3 de L.
amazonensis, foi percebido que ao se mutar três motivos implicados na à PABP e o
possível sítio de ligação ao EIF4G, sua fosforilação diminuiu drasticamente,
sugerindo a necessidade destas interações para que a fosforilação ocorra. Estes
resultados indicam um complexo mecanismo de modificações pós-traducionais
responsáveis pela regulação do EIF4E3 e contribuem a para a caracterização da
sua função em Leishmania
Keywords in Portuguese
Leishmania, EIF4E3, modificações pós-traducionaisDeCS
Leishmania mexicana/genéticaLeishmania mexicana/metabolismo
Leishmania infantum/genética
Leishmania infantum/metabolismo
Fator de Iniciação 4F em Eucariotos
Expressão Gênica
Ligação Proteica
Biossíntese de Proteínas
Homologia de Sequência do Ácido Nucleico
Proteínas de Protozoários
Proteínas de Ligação a Poli(A)
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