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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/14052
AVALIAÇÃO DO TESTE RÁPIDO SANDFLY PARA INFECÇÃO NATURAL POR LEISHMANIA EM FLEBOTOMÍNEOS
Dias, Quezia Nunes Peres | Date Issued:
2015
Alternative title
Rapid test evaluation Sandfly to natural infection by Leishmania in sand fliesAuthor
Advisor
Affilliation
Fundação Oswaldo Cruz. Escola Nacional de Saúde Pública Sergio Arouca. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Abstract in Portuguese
Este trabalho buscou avaliar a eficiência do teste rápido SandFly em campo, tendo a
PCR como padrão ouro. As coletas e a realização dos testes se deram na Ilha da
Marambaia, Estado do Rio de Janeiro, que possui registros de LTA em humanos e LVC.
As capturas de flebotomíneos ocorreram utilizando armadilhas luminosas do tipo CDC,
que funcionaram entre 19:00 hr e 7:00 hr da manhã seguinte, durante 2 meses
consecutivos, Setembro e Outubro de 2014, totalizando 8 coletas em 5 áreas distintas.
No total, foram coletados 1505 espécimes de flebotomíneos. Para o diagnóstico de
infecção, as fêmeas de cada coleta foram escolhidas ao acaso e separadas em pools de
dez; cada pool foi macerado com o tampão de lise e metade de cada amostra foi
utilizada nos testes; a outra metade foi encaminhada para realização da PCR. O restante
dos flebotomíneos foi encaminhado para identificação de espécies. Nos TRs, 4
resultados foram positivos, 1 em Setembro (amostra A13) e 3 em Outubro (B11, B13 e
B14) nos 49 pools analisados, todos sendo fracos. O diagnóstico pela PCR revelou
infecção natural por Leishmania em flebotomíneos de 3 áreas na Ilha de Marambaia:
Praia Grande, Praia de São José e Praia da Cutuca: 7 resultados positivos (A13, A17,
A18, A19, A22, A23 e A24) nas 29 amostras de Setembro e 7 resultados positivos (B01,
B02, B05, B06, B09, B13 e B17) nas 19 amostras com fêmeas de Outubro, totalizando
14 resultados positivos. Comparando ao padrão ouro, dos 49 testes realizados: 2
revelaram ser verdadeiros positivos, 33 verdadeiros negativos, 2 falsos positivos e 12
falsos negativos. Cálculos foram feitos para avaliar a eficiência do TR comparado à
PCR: a sensibilidade relativa encontrada foi de 14% e a especificidade relativa de
94,2%. O Valor Preditivo Positivo encontrado foi VPP= 0,50 enquanto o Valor Preditivo
Negativo foi VPN= 0,73; a acurácia foi 0,71. Para verificar a concordância entre os
testes diagnósticos foi utilizado o índice de concordância de Kappa. Esta concordância
foi considerada fraca, com o valor de k= 0,1091. Concluiu-se que apesar do teste rápido
SandFly possuir boa especificidade, a sensibilidade deve ser melhorada. Para identificar
as espécies de flebotomíneos foi utilizada a nomenclatura de Galati (2003); dentre essas,
6 espécies foram identificadas Nyssomyia intermedia, Migoneimyia migonei, Pintomyia
fischeri, Evandromyia edwardsi, Brumptomyia sp. e Micropygomyia capixaba. Cabe
ressaltar que as taxas de infecção encontradas foram altas e carecem de mais
investigações. A taxa mínima de infecção referente aos dois meses foi de 2,9% e a taxa
mínima de infecção em Praia Grande nos dois meses foi de 3,5%. A melhora da
sensibilidade do teste rápido e sua validação de campo apontam para um avanço
significativo na luta contra as Leishmanioses.
Abstract
This study aimed to evaluate the efficiency of the Sandfly rapid test in the field
considering the PCR as the gold standard. The collections and the tests were performed
in Marambaia Island (State of Rio de Janeiro) that has records of Tegumentar
Leishmaniasis in humans and Visceral Leishmaniasis in dogs. The collections were
performed using CDC light traps from 7 pm to 7 am, for 2 consecutive months -
September and October 2014, totaling 8 collections in 5 different areas. A total of 1505
sandflies were collected. Females of each collection were chosen at random and stored
in labeled pools of 10 specimens. Each pool was macerated with lysis buffer solution
and half of each sample was used in the tests; the other half of the samples was referred
for evaluation of infection by Leishmania spp. through PCR. The remaining sandflies
were sent for species identification. 4 rapid test results were positive - 1 September
(sample A13) and 3 October (B11, B13 and B14) in the 49 analyzed pools and all were
weak. Diagnosis by PCR revealed Leishmania natural infection in 3 areas in Marambaia
Island: Praia Grande, Praia de São José and Praia da Cutuca. It was 7 positive results
(A13, A17, A18, A19, A22, A23 and A24) in 29 samples of September and 7 positive
results (B01, B02, B05, B06, B09, B13 and B17) in 19 samples with October females,
totaling 14 positive results. Considering PCR as the gold standard, 2 rapid tests results
were evaluated as true positives, 33 as true negative, 2 as false positives and 12 as false
negatives. Some calculations were performed to evaluate the rapid test efficiency
compared to PCR. The relative sensitivity was 14% and the relative specificity was
94.2%. The Positive Predictive Value was PPV = 0.50 while the Negative Predictive
Value was 0.73. The accuracy was 0.71. The Kappa agreement index was used to verify
the correlation between the diagnostic tests, that was considered weak, with the value
of k = 0.1091. It was concluded that despite the Sandfly rapid test has a good specificity
the sensitivity needs to be improved. 6 species of sandflies were identified: Nyssomyia
intermedia, Migoneimyia migonei, Pintomyia fischeri, Evandromyia edwardsi,
Brumptomyia sp. and Micropygomyia capixaba. It is noteworthy that infection rates
found were high and require more investigation. The minimum infection rate of the two
months was 2.9% and the minimum rate of infection in Praia Grande within two months
was 3.5%. The improvement of the rapid test sensitivity and its field validation points to
a significant advance in the fight against Leishmaniasis.
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